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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2478| Neutralización de la enzima esfingomielinasa-D de la araña Loxosceles reclusa, utilizando un fragmento de dominio sencillo tipo vNAR, del tiburón Heterodontus francisci Neutralizacion of the Sphingomyelinase-D enzime from the Loxosceles reclusa spider, using a VNAR type single domain fragment, from a Heterodontus francisci shark | |
| José Félix Olivares Quintero | |
| Alexei Fedorovish Licea Navarro | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Loxosceles reclusa, Araña, Enzima esfingomielinasa-D, Heterodontus francisci, vNAR, Tiburón toro, Ciencias del mar | |
| El término loxoscelismo se utiliza para describir las lesiones y manifestaciones clínicas causadas por la mordedura de las arañas del género Loxosceles, las cuales pueden ir desde una lesión cutánea que puede evolucionar a necrosis, o a una úlcera necrótica de curación lenta (67-100%) hasta la presencia de alteraciones hemolíticas severas que pueden causar la muerte del paciente (0-30%). La enzima esfingomielinasa D (SMD) es considerada como el componente principal del veneno y responsable de las patologías observadas en humanos. Para aislar mediante la técnica de despliegue en fagos, aquellos VNAR que tuvieran la capacidad de reconocer y neutralizar a la SMDrLr, en este trabajo se utilizó una biblioteca de anticuerpos de dominio sencillo tipo VNAR, obtenida del tiburón Heterodontus francisci previamente inmunizado con la enzima SMD recombinante de la araña Loxosceles reclusa (SMDrLr). Se logró aislar tres VNAR – LR3, LR9 y LR10 – que tienen la capacidad para reconocer a la SMDrLr in vitro. Asimismo, bajo las condiciones utilizadas en este trabajo, el VNAR LR3, mostró tener la capacidad para neutralizar a la enzima in vivo. Aún cuando es necesario realizar ensayos de neutralización en un mayor número de ratones, así como determinar la capacidad del VNAR LR3 para inhibir la actividad enzimática de la SMDrLr in vitro, nuestros resultados podrían representar una nueva alternativa para el tratamiento eficaz del loxoscelismo. The word loxoscelism describes injuries and clinical signs caused by the bite of spiders Loxosceles spp., ranging from skin lesions that may progress to necrosis, or to slow-healing necrotic ulcer (67-100%) up to severe hemolytic disorders that may cause death (0-30%). The enzyme sphingomyelinase D (SMD) is considered the main component of the venom and is responsible for the observed pathologies in humans. In order to isolate, through the phage display technique, those VNAR capable to recognize and neutralize the SMDrLr, we employed a library of single domain antibodies (VNAR type) obtained from the shark Heterodontus francisci previously immunized with the recombinant enzyme SMD of Loxosceles reclusa (SMDrLr). We isolated three VNAR’s - LR3, LR9 and LR10 capable to recognize the SMDrLr in vitro. Also, under the conditions used in this work, the LR3 VNAR, showed the ability to neutralize the enzyme in vivo. Although there is still the need of more neutralization trials using a larger number of mice, as well as experiments to establish the ability of the LR3 VNAR to inhibit the enzymatic activity of SMDrLr in vitro, our findings may represent a new alternative for an effective treatment of loxoscelism. | |
| CICESE | |
| 2012 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Abraján Guerrero,R.2011. Sintonización óptima de controladores, aplicación a un péndulo invertido. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 101 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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