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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3226| Selección y caracterización de nanoanticuerpos de camélidos Anti-CDH11 Selection and characterization of camelids anti-CDH11 Nanobodies | |
| IVAN ANDRES ROSALES FUERTE | |
| RUBEN DARIO CADENA NAVA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Nanoanticuerpo, Cadherina-11, Despliegue en fagos, Dominio VHH Nanobody, Cadherin-11, Phage Display, VHH Domain | |
| Las cadherinas son moléculas de adhesión fundamentales para el correcto funcionamiento de las células eucariotas. Además, las cadherinas están involucradas en la adhesión celular, son relevantes para diversas vías de señalización celular, promoviendo características como migración, crecimiento y diferenciación celular. Así mismo, la cadherina-11 (CDH11), esta sobre expresada en diversas patologías tales como artritis reumatoide y algunos canceres epiteliales cuando se vuelven metastásicos. Es por esto, que en este trabajo se propone la selección de un dominio VHH (nanoanticuerpo) especificó para el ectodominio 1 de la cadherina 11. (CDH11-EC1). El método de selección fue realizado por medio del despliegue en fagos, obteniendo bacteriófagos recombinantes con el domino VHH contrala CDH1-EC1. Para la obtención de los bacteriófagos recombinantes, después de la inmunización de las llamas se generó una biblioteca inmune de ≈107 transformantes. Posteriormente, después de tres rondas de selección y pruebas de ELISA, se obtuvieron los bacteriófagos recombinantes capaces de reconocer al CDH11-EC1. De igual manera, se realizaron ensayos en la línea celular MDA-MB-231, la cual expresa CDH11. Estos resultados muestran que los bacteriófagos recombinantes son capaces de reconocer a la CDH11 en esta línea celular, con lo cual se demuestra la correcta selección del nanoanticuerpo anti-CDH11. Cadherins are fundamental adhesion molecules for the correct functioning of eukaryotic cells. In addition, the cadherins are involved in cell adhesion, cell signaling pathways, and these are involved in migration, growth and cell differentiation. Likewise, cadherin-11 (CDH11) is overexpressed in various pathologies such as rheumatoid arthritis and some epithelial cancerous cells when they become metastatic. Therefore, in this work, the selection of a VHH domain (nanoantibody) specified for ectodomain 1 of cadherin 11 (CDH11-EC1) is proposed. The selection method was performed through phage display, obtaining recombinant bacteriophages with the VHH domain against CDH1-EC1.To obtain the recombinant bacteriophages, after the llama immunization, an immune library of ≈107 transformants was generated. Subsequently, after three rounds of ELISA selection and testing, the recombinant bacteriophages capable of recognizing CDH11-EC1 were obtained. Similarly, recombinant phages CDH11 were tested on the MDA-MB-231 cell line, which expresses CDH11. These results showed that recombinant bacteriophages are capable of recognizing CDH11 in this cell line, thereby demonstrating the correct selection of the anti-CDH11 nanoantibody. | |
| CICESE | |
| 2020 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Rosales-Fuerte, I. A. 2020. Selección y caracterización de nanoanticuerpos de camélidos anti-CDH11. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 68 pp. | |
| BACTERIÓFAGOS | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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| Fichero | Descripción | Tamaño | Formato | |
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| Tesis Ivan Andres Rosales Fuerte_Final_18_feb_2020.pdf | Versión completa de la tesis | 2.13 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |