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Efecto de las conotoxinas xm1a, xm1b, xm1c y xm1d del cono de mar Conasprella ximenes en cultivo celular de macrófagos infectados con Mycobacterium tuberculosis
Effect of the conotoxins xm1a, xm1b, xm1c and xm1d of the conus Conasprella ximenes in cell culture of infected macrophages with Mycobacterium tuberculosis
ANA GABRIELA CAMORLINGA ROJAS
Alexei Fedorovish Licea Navarro
Acceso Abierto
Atribución
Macrófago, Mycobacterium tuberculosis, receptores nicotínicos de acetilcolina, conotoxinas, péptidos
Macrophage, Mycobacterium tuberculosis, nicotinic acetylcholine receptors, conotoxins, peptides
Mycobacterium tuberculosis (MTB) es un patógeno intracelular que comúnmente se aloja dentro de los macrófagos alveolares, para de esta manera, evadir la respuesta del sistema inmunológico y lograr su supervivencia dentro del hospedero. Existen mecanismos descritos que la micobacteria utiliza para impedir que, una vez fagocitada, el macrófago pueda degradarla en su interior. En este trabajo se examinó la actividad de cuatro conotoxinas sintéticas basadas en toxinas del cono Conasprella ximenes, como compuestos potenciales que participan en la activación del macrófago, para que éste sea capaz de lisar a la bacteria en su interior. Se evaluó el efecto en la transcripción de citocinas de los péptidos en una línea celular de macrófagos de ratón, y se encontró que los péptidos no tuvieron un efecto promotor de las citocinas pro-inflamatorias. Sin embargo, al aplicar los péptidos como tratamiento en las células que previamente fueron infectadas con la cepa H37Rv de Mycobacterium tuberculosis, se observó una reducción significativa del número de unidades formadoras de colonia (UFC) posterior a la lisis celular. Este efecto en la reducción se observó principalmente a concentración de 5 μM para los péptidos xm1c y xm1d, y a 0.5 μM para el péptido xm1d. Al evaluarse los péptidos en una de las cepas multirresistente de M. tuberculosis (1820) no se observó efecto alguno en la reducción de las UFC. Gracias a este trabajo se implementó un modelo de infección in vitro de macrófagos, por lo que se podrá continuar con investigación al respecto y evaluar el efecto de los péptidos en otras cepas de MTB.
Mycobacterium tuberculosis (MTB) is an intracellular pathogen that commonly lodges inside the alveolar macrophages, in order to evade the response of the immune system and achieve its survival inside the host. There are described mechanisms that the mycobacterium uses to prevent that, once phagocytosed, the macrophage can degrade it inside. In this work we examined the activity of four synthetic conotoxins based on toxins from from Conasprella ximenes, as potential compounds that participate in the activation of the macrophage, so that it is able to lyse the bacteria inside it. We evaluate the effect on the transcription of cytokines of the peptides in a mouse macrophage cell line, and it was found that the peptides did not have a promoter effect of the pro-inflammatory cytokines. However, by applying the peptides as a treatment in cells that were previously infected with the H37Rv strain of Mycobacterium tuberculosis, a significant reduction in the number of colony forming units (CFU) after cell lysis was observed. This effect on the reduction was observed mainly at the concentration of 5 μM or the peptides xm1c and xm1d, and at 0.5 μM for the peptide xm1d. When evaluating the peptides in one of the multidrug-resistant strains of M. tuberculosis (1820), no effect was observed in the reduction of CFU. Thanks to this work, an in vitro infection model of macrophages was established, so that we can continue with research on this and evaluate the effect of the peptides in other strains of MTB.
CICESE
2018
Tesis de maestría
Español
Camorlinga Rojas, A. G. 2018. Efecto de las conotoxinas xm1a, xm1b, xm1c y xm1d del cono de mar Conasprella ximenes en cultivo celular de macrófagos infectados con Mycobacterium tuberculosis. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 46 pp.
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