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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/1045| Dinámica de la flipasa de fosfolípidos DNF-2 y su papel en el crecimiento polarizado en Neurospora crassa Dynamic of the phospholipid flippase DNF-2 and its role in the polarized growth in Neurospora crassa | |
| IVAN MURILLO CORONA | |
| ROSA REYNA MOURIÑO PEREZ | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| La asimetría de fosfolípidos de las membranas es una topología importante para la formación de vesículas en el tráfico vesicular. La producción de curvatura en la membrana parece ser una fuerza impulsora para la formación de vesículas. Las proteínas involucradas en la translocación de fosfolípidos a través de la membrana para producir la asimetría son miembros de la familia de las flipasas. Estas son proteínas ATPasas tipo P4 que producen un cambio en la carga y composición de la cara interior de la membrana. En este trabajo, se estudió DNF-2, que es una flipasa de aminofosfolípidos, presuntamente responsable del mantenimiento de la asimetría de la membrana, en Neurospora crassa. Se obtuvo una mutante por deleción del gen dnf-2 (NCU00352) y una cepa que expresaba la proteína quimérica DNF-2-GFP para evaluar su dinámica y localización en células de N. crassa. DNF-2-GFP se localizó en el núcleo del Spitzenkörper, similar a la localización de las quitina sintasas, pero estaba ausente en los septos. Mutantes Δdnf-2 presentaban una reducción del crecimiento de 42.4% en comparación con la cepa silvestre (WT). En la cepa mutante la conidiación fue afectada. Esta cepa producía solo un 50.1% de los conidios producidos por la cepa WT. Además las células de la mutante Δdnf-2 presentaron un crecimiento hifal caracterizado por periodos de polarización, intercalados con periodos de crecimiento isotrópico. Se observó que el Spitzenkörper era inestable y se dividía. La división del Spitzenkörper producía ramificaciones apicales. Estos resultados sugieren que DNF-2, no es esencial pero está involucrada en la estabilidad del Spitzenkörper y en el crecimiento celular. Phospholipid membrane asymmetry is an important topography feature for vesicle formation in vesicle traffic. The production of a curvature in the membrane seems to be a driving force for vesicle formation. Flippases are involved in these phospholipids translocation to the cytosolic leaflet of the membrane. These proteins are P-Type 4 ATPases that produce a shift in the charge and composition of the inner leaflet of the membrane. In this work DNF-2, a putative aminophospholipid flippase responsible for the maintenance of the asymmetry of the membrane, was studied in Neurospora crassa. A dnf-2 (NCU00352) gene deletion mutant and a strain expressing the chimeric protein DNF-2-GFP to assess its dynamic and organization in living cells of N. crassa. DNF-2-GFP was localized in the core of the Spitzenkörper, similar to the localization of chitin synthases, but it is completely absent in septa. The Δdnf-2 mutant had a growth rate reduction of 42.34% in comparison with the wild type (WT) strain. Conidiation was affected, producing only 50.1% of the total conidia produced by WT. Cells of the Δdnf-2 mutant showed a distorted hyphal morphology with growth intercalating periods of polarized growth and periods of isotropic growth. The Spitzenkörper was unstable and divided frequently giving rise to apical branches. These results suggest that DNF-2 is not essential, but is involved in Spitzenkörper stability and cell growth. | |
| CICESE | |
| 2017 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Murillo-Corona I. 2017 Dinámica de la flipasa de fosfolípidos DNF-2 y su papel en el crecimiento polarizado en Neurospora crassa. Tesis de Maestria en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 49pp | |
| HONGOS | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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