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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/1133
Caracterización electrofisiológica del veneno del caracol marino Conus californicus en canales iónicos de potasio Electrophysiological Characterization of the Venom of Marine Snail Conus californicus in Potassium Ion Channels | |
Karla Oyuky Juárez Moreno | |
ALEXEI FEDOROVISH LICEA NAVARRO Jose De Jesus Garcia Valdes | |
Acceso Abierto | |
Atribución | |
Ciencias del mar,Caracol marino,Electrofisiología,Canales iónicos de potasio,Conus californicus,κ-conotoxinas,Electrofiología | |
Los caracoles del género Conus, tienen un aparato venenoso que les sirve para cazar y como defensa contra sus depredadores. El veneno de estos caracoles contiene péptidos ricos en cisteínas llamados conotoxinas. Éstas se organizan en cabales, que son toxinas de diferentes tipos que actúan de manera conjunta para generar el mismo efecto fisiológico final. Las conotoxinas se unen de forma específica y con gran afinidad a sus blancos, constituidos por canales iónicos y algunos receptores. Por ello algunas de estas toxinas están en pruebas clínicas para el tratamiento de enfermedades como el dolor crónico. Las conotoxinas que se unen a canales iónicos de potasio han sido poco estudiadas, a pesar de la amplia distribución y abundancia de este tipo de canales. En este trabajo, se determinó que en el veneno de Conus californicus existen toxinas que afectan los canales iónicos de potasio: Shaker y Hslo expresados heterólogamente en ovocitos de las ranas de la especie Xenopus laevis. El efecto de distintas fracciones obtenidas por HPLC en Fase Reversa del veneno de C. californicus sobre los canales de potasio, fue medido con la técnica de Fijación del Voltaje por Dos Electrodos. Los resultados obtenidos indican que en el veneno de C. californicus existen al menos tres fracciones que disminuyen de manera considerable la corriente del canal de potasio Shaker IR. Esta actividad se localiza en las fracciones obtenidas mediante HPLC que eluyen en los minutos 5, 28 y 44. El porcentaje de disminución de la corriente para la fracción del minuto 5 fue de 40%, para el minuto 28 fue de 55% y para el minuto 44 fue de 44%. En el caso del canal Hslo, hasta el momento se tiene precisado que en las fracciones obtenidas por HPLC que eluyen en los minutos 20-25 y 45-50 existió una disminución de la corriente del 20% y 12% respectivamente; sin embargo este efecto no pudo ser detectado al evaluar los minutos individuales de las fracciones debido a la baja concentración de las mismas. También se determinó que el veneno de C. californicus varía dependiendo de la temporada del año en la cual se recolectaron los organismos. The marine snail Conus californicus has a venom apparatus used to kill its prey; the venom contains an unique set of 50 to 200 different peptides called conotoxins. Those have a highly targeting selectivity of voltage-gated and ligand-gated ion channels, acting as blockers of voltage-gated Ca2+, Na+ and K+ channels. Due to the high selectivity and affinity of these toxins, several of them are in various stages of clinical development for treatment of human diseases. Despite of its variability, only few conotoxins acting on K+ channels have been identified and characterized, and were commonly called κ-conotoxins. Potassium channels are a big family of proteins greatly distributed among all the kingdoms, and have been implicated in relevant neurodegenerative pathologies such as Parkinson’s and Alzheimer’s diseases and chronic pain. In this study we purified different fractions of the venom of C. californicus by RP-HPLC according to its retention time. We tested the effect of those fractions in heterologous expressed K+ channels as Shaker IR and Hslo channel in Xenopus laevis oocytes using the Two Electrode Voltage Clamp technique. Up to date, our results indicated that in the venom of C. californicus there are at least three fractions in the minutes 5, 28 and 44, which caused a significant decrease of the current when were tested on the Shaker IR channel in 40%, 55% and 44% respectively. In the case of the Hslo channel, there are two fractions in the minutes 20 to 25 and 45 to 50, which diminished the current of the channel in 20% and 12% respectively, we tried to test the individual minutes but was unable because of its low concentration. We stated that the venom of the marine snail C. californicus had a different activity according with the season in which the organisms were collected. | |
CICESE | |
2005 | |
Tesis de maestría | |
Español | |
Juárez Moreno, K.O.2005.Caracterización electrofisiológica del veneno del caracol marino Conus californicus en canales iónicos de potasio.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.138pp. | |
MICROBIOLOGÍA | |
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