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Papel del flujo citoplasmático y las proteínas motoras asociadas a los microtúbulos en el desplazamiento nuclear en hongos filamentosos
Role of cytoplasmic flow and motor proteins associated to microtubules on the nuclear displacement in filamentous fungi 
Silvia Lucrecia Ramos García
Rosa Reyna Mouriño Perez
Acceso Abierto
Atribución
Ciencias del mar,Neurospora crassa,Dezplazamiento,Núcleos 
El movimiento y localización de los núcleos son eventos multifactoriales que se han venido estudiando las últimas dos décadas sin llegar a un acuerdo de qué es lo que principalmente mueve a los núcleos dentro de las hifas. Con el propósito de proporcionar información sobre este tema, se realizó un estudio para describir el movimiento de los núcleos en la zona subapical y los factores que pueden estar asociados tales como el flujo citoplasmático, los microtúbulos, los microfilamentos de actina y las proteínas motoras (complejo dineína/dinactina y cinesina). Se realizó Microscopía Confocal de cinco cepas de Neurospora crassa con los núcleos marcados con GFP, una sin mutaciones (control), tres con mutaciones simples ropy-1, ropy-3 y ∆nkin y una doble mutante ropy-1/∆nkin. Adicionalmente se realizaron observaciones en la cepa control tratada con Benomilo (MBC) y Citocalasina A (CA) con la finalidad de determinar que elementos influyen más en el desplazamiento nuclear. Se observó en todas las cepas que los núcleos se mueven en forma bidireccional o se estacionan, excepto en la doble mutante en donde el movimiento retrogrado estaba anulado. El desplazamiento de los núcleos fue muy cercano al índice de elongación de la hifa en el control (0.13 ± 0.08; 0.14 ± 0.13 µm s<sup>-1</sup>), ropy-1 (0.02 ± 0.04; 0.02 ± 0.12 µm s<sup>- 1</sup> ), ropy-3 (0.05 ± 0.06; 0.06 ± 0.10 µm s<sup>-1</sup>), ropy-1/∆nkin (0.05 ± 0.09; 0.04 ± 0.10 µm s<sup>-1</sup>) y en las tratadas con MBC (0.05 ± 0.09; 0.05 ± 0.12 µm s<sup>-1</sup>), no así en la mutante ∆nkin (0.03 ± 0.08; 0.03 ± 0.21 µm s<sup>-1</sup>) y en las tratadas con CA (0.005 ± 0.03; 0.001 ± 0.10 µm s<sup>-1</sup>). Los núcleos mostraron diferencias en la morfología, en el control eran alargados mientras que en las otras cepas se observaron en forma esférica. La zona de exclusión de los núcleos se acorta en la ausencia de proteínas motoras o microtúbulos y se anula en ausencia de microfilamentos de actina. En conclusión, el movimiento y distribución de los núcleos esta determinado por diferentes fuerzas, en hifas maduras el motor fundamental es el flujo citoplásmico. Sin embargo, las proteínas motoras son la unión de núcleos y microtúbulos y la actina es el armazón que une estos elementos para ser desplazados como una unidad por el citoplasma.  
Nuclei movement and localization are multifactorial events that have been studied by the last two decades without any agreement. With the porpoise of provide information about it we carry out an study to describe subapical nuclei movement and factors that could be related like citoplasmic flow, microtubules, actin microfilaments and motor proteins (dinein-dinactic complex and kinesin).We used Confocal Microscopy of five Neurospora crassa strains with nuclei labeled with GFP. One strain mutation free (blank), three simple mutants ropy-1, ropy-3, ∆nkin and one double mutant ropy-1/∆nkin. Additionally we made observations is blank treated with Benomyl (MBC) and Citochlasin A (CA).We observed that nuclei have moved on a bidirectional way or have stopped, excepton double mutant where retrograde movement was null. Nuclei displacement was very close to the hypha elongation rate on blank (0.13±0.08; 0.14 ± 0.13 µm s<sup>-1</sup>),ropy-1 (0.02 ± 0.04; 0.02 ± 0.12 µm s<sup>-1</sup>), ropy-3 (0.05 ± 0.06; 0.06 ± 0.10 µm s<sup>-1</sup>), ropy-1/∆nkin (0.05 ± 0.09; 0.04 ± 0.010 µm s<sup>-1</sup>) and MBC treated  (0.05 ± 0.09 ±; 0.05 ± 0.12 µm s<sup>-1</sup>), but not on ∆nkin (0.03 ± 0.08; 0.03 ± 0.21 µm s<sup>-1</sup>), neither CA treated (0.05 ± 0.03; 0.001 ± 0.10 µm s<sup>-1</sup>).Nuclei showed morphology differences: on blank were large whereas other strainswere spherical form. Nuclei exclusion zone was shorter in the absence of motorproteins and null in the absence of actin microfilaments. In conclusion, nuclear movement and distribution are determined by differentforces; on mature hyphae fundamental motor is citoplasmic flow. Although, motorproteins are nuclei union to microtubules and actin is the shell that merge this elements to be displaced like a unit by the flow-through.
CICESE
2006
Tesis de maestría
Español
Ramos García, S.L.2006.Papel del flujo citoplasmático y las proteínas motoras asociadas a los microtúbulos en el desplazamiento nuclear en hongos filamentosos.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.62 pp.
MICROBIOLOGÍA
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