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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/1145| Localización in vivo de la proteína homóloga de Saccharomyces cerevisiae Spa2 marcada con GFP en Neurospora crassa In vivo localization of Saccharomyces Cerevisiae SPA2p homologue labeled with GFP in Neurospora Crassa | |
| Cynthia Lizzeth Araujo Palomares | |
| Ernestina Castro Longoria | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Neurospora crassa,Saccharomyces cerevisiae Spa2,Proteínas,Ciencias del mar | |
| Neurospora crassa es un hongo ascomiceto filamentoso que presenta un crecimiento polarizado o apical, un proceso fundamental para la formación de las unidades de crecimiento vegetativo o hifas. En los sitios de crecimiento apical se acumulan y coordinan múltiples complejos proteicos para asegurar que los componentes celulares se incorporen a la membrana plasmática para ir formando una nueva pared celular y así mantener un crecimiento polarizado. Uno de estos complejos proteicos es el polarisoma el cual está constituido por las proteínas Spa2p, Pea2p, Bud6p, Aip3p y Bni1p en Saccharomyces cerevisiae. Sin embargo en hongos filamentosos aún se desconocen en su totalidad los componentes del polarisoma. En este trabajo se marcó con la proteína fluorescente verde (GFP) la proteína homóloga Spa2 y mediante microscopía confocal se determinó su localización in vivo en el hongo filamentoso N. crassa. Se examinaron las células fúngicas desde la germinación hasta la formación de hifas maduras. Spa2-GFP se encontró localizada en los ápices celulares de germínulas en la etapa de elongación del tubo germinativo y en las hifas maduras. Se encontró que Spa2 no interviene en la formación de septos y se sugiere que se encuentra involucrada en la formación de ramificaciones laterales. Mediante el uso del colorante vital FM4-64 se observó que Spa2 colocaliza con el cuerpo apical o Spitzenkörper (Spk) tanto en germínulas como en las hifas maduras del hongo. Primeramente ocurre la acumulación de Spa2 en el ápice de las germínulas y conforme el tubo germinativo se elonga Spa2 aumenta su concentración de manera gradual, posteriormente aparece el Spk. Una vez que ambos colocalizan en el ápice celular la localización de Spa2-GFP y del Spk-FM4-64 es exactamente la misma. Esto sugiere fuertemente que el polarisoma es uno de los componentes necesarios para el ensamblaje del Spk y el crecimiento polarizado en N. crassa. Neurospora crassa is a filamentous fungus that presents apical or polarized growth, a fundamental process for the formation of vegetative units or hyphae. At sites of apical growth, multiple protein complexes assemble to ensure that cellular components get incorporated in to the plasma membrane for building new cell wall and maintain a polarized growth. One of this protein complexes is the polarisome, which in Saccharomyces cerevisiae contains Spa2p, Pea2p, Bud6p, Aip3p and Bni1p. In filamentous fungi there are few studies about the components of the polarisome. In this work, the N. crassa homologue protein Spa2 was labeled with the green fluorescent protein (GFP) and its localization was determined in vivo by laser scanning confocal microscopy in N. crassa growing hyphae. Cells were analyzed from the germination phase until mature hyphae were formed. Spa2- GFP was present at the cellular apex in germlings in the elongation phase and in mature hyphae. Also it was found that Spa2 is not required for septum formation, but it is involved in lateral branching formation. By using the vital dye FM4-64 it was observed that Spa2 colocalizes with the apical body or Spitzenkörper (Spk) at the tips of germlings and mature hyphae. Spa2 accumulates at the apex of the germlings and as the germ tube elongates, the concentration of Spa2 increases gradually, subsequently the Spk appears. From this point on, both Spa2-GFP and Spk-FM4-64 continued to colocalize in the cell apex. The evidence presented here strongly suggests that the polarisome is one of the early components needed for Spk assembly and polarized growth in N. crassa. | |
| CICESE | |
| 2007 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Araujo Palomares, C.L.2007.Localización in vivo de la proteína homóloga de Saccharomyces cerevisiae Spa2 marcada con GFP en Neurospora crassa.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.99 pp | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias |
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