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Expresión de genes inmunorrelacionados y de estrés térmico en abulón rojo, Haliotis rufescens, sintomático al síndrome de deshidratación
Expression of immune related genes and heat shock in red abalone Haliotis rufescens asymptomatic to the withering syndrome
Luis Miguel Molina Carrillo
Miguel Angel Del Río Portilla
MONICA HERNANDEZ RODRIGUEZ
Acceso Abierto
Atribución
Abulón rojo, síndrome de deshidratación,genes inmunorrelacionados,análisis transcriptómico
El síndrome de deshidratación (SD) es una enfermedad crónica causada por Xenohaliotis californiensis, un procariota del orden Rickettsiales (PTR), que afecta a diversas especies de abulón. La enfermedad está acompañada de una serie de cambios fisiológicos que involucran los mecanismos de defensa del hospedero. Los mecanismos de defensa del huésped a nivel molecular dependen de la expresión de genes específicos asociados a su vez con la producción de ciertas proteínas en cantidades apropiadas que representan a la respuesta inmune. El objetivo de este estudio fue evaluar los niveles de expresión de seis genes relacionados con respuesta inmune (KLF, Factor Tipo Kruppel; AbTNF-a, Abulón Factor de Necrosis Tumoral- alfa; MEP, Proteína Expresada por Macrófagos), metabolismo antioxidante (Catalasa; SeGPx, glutatión peroxidasa dependiente de selenio; GSTisof1, glutatión peroxidasa isoforma 1) y proteínas de shock térmico (HSP70 y HSP90) en diferentes tejidos (branquias, postesófago y recto) del abulón rojo cultivado, Haliotis rufescens sintomático y asintomático al SD. La expresión de estos genes se compararon con otros relacionados al estrés (Ferritina) y metabolismo (Alginasa), utilizando como gen de mantenimiento la proteína ribosomal L5 (RFLP5). La expresión de genes relacionados con inmunidad y estrés térmico se evaluó mediante RT-PCR cuantitativa en tiempo real. La expresión relativa se estimó a partir del Ct promedio del duplicado de cada gen objetivo, normalizando con el valor promedio de Ct del gen de referencia (RPL5). Se realizó la comparación de los niveles de expresión de genes entre organismos asintomáticos y sintomáticos a SD. Así como de un grupo control que se trató con oxitetraciclina para garantizar la ausencia de X. californiensis. Los resultados indican que los niveles y los perfiles de expresión se alteraron en organismos asintomáticos y sintomáticos en diferentes magnitudes en comparación con el control (LSD). Los tres genes que mostraron los mayores niveles de expresión en organismos asintomáticos fueron; en branquia: GSTisof1 (122.0 veces), Ferritina (11.3 veces) y SeGPx (3.2 veces); en postesófago: GSTisof1 (128.0 veces), Alginasa (36.8 veces) y HSP90 (2.8 veces); en recto: Gstisof1 (84.4 veces), Alginasa (8.6 veces) y SeGPx (2.7 veces). En sintomáticos fueron: branquia GSTisof1 (34.4 veces), Catalasa (14.9 veces) y Ferritina (9.2 veces); postesófago GSTisof1 (55.7 veces), Alginasa (5.6 veces) y HSP90 (3.0 veces); en recto GSTisof1 (19.7 veces), HSP90 (2.2 veces) y Ferritina (2.0 veces). En conclusión, los genes GSTisof1, Alginasa, Ferritina, HSP90, y SeGPx, podrían ser estimulados por la enfermedad (SD), y tener un papel importante en el sistema inmunológico del abulón rojo. Asimismo, la participación de la citoquina AbTNF-a y la proteína MEP exclusivamente en el grupo ASD podrían eventualmente conducir a la identificación de genes de resistencia a la infección ocasionada por X. californiensis.
Withering syndrome (WS) is a chronic disease caused by Xenohaliotis californiensis, a Rickettsia-like prokaryote (RLP), which affects several abalone species in wild and culture conditions. However, there is limited information available regarding the effects of this disease on the protective immune response of infected abalone. In this study, we investigated the expression of genes related to: immune (KLF, Kruppel Like Factor; AbTNF-a, Abalone Tumor Necrosis-alfa; MEP, Macrófagos Expressed Protein), antioxidant metabolism (Catalase; SeGPx, Selenium dependent glutathione-S-transferase; GSTisof1, glutathione-S-transferase isoform 1) and heat shock proteins (HSP70 y HSP90)from different tissues (gills, postesophagus and rectum) of cultured red abalone, Haliostis rufescens. The expression of these was compared with other genes related with stress (Ferritin) and metabolism (Alginase) using the Ribosomal Protein L5 (RPL5) as a control. Relative expression was estimated from the average Ct duplicate of each target gene normalizing the average Ct value of the reference gene (RPL5). Additionally, a control group was treated with oxytetracycline to warranty the absence of X. californiensis. Our results indicated that expression levels were altered in asymptomatic and symptomatic organisms at different magnitudes compared to the control (LSD). The three genes showed higher expression levels in organisms were asymptomatic; in the gill: GSTisof1 (122.0-fold), Ferritin (11.3-fold) and SeGPx (3.2-fold) in the postesophagus: GSTisof1 (128.0-fold), Alginase (36.8-fold) and HSP90 (2.8-fold), in the rectum: Gstisof1 (84.4-fold), Alginase (8.6-fold) and SeGPx (2.7-fold). The symptomatic organisms showed a increase in the expression of gen GSTisof1 in the gill (34.4-fold), Catalase ( 14.9-fold) and Ferritin (9.2-fold) ; in the postesophagus GSTisof1 (55.7-fold), Alginase (5.6- fold) and HSP90 (3.0-fold); in the rectum GSTisof1 (19.7-fold), HSP90 (2.2-fold) and Ferritin (2.0-fold). In conclusion, the genes GSTisof1, Alginase, Ferritin, HSP90 and SeGPx could respond to the disease (WS), and may have an important role in the immune system of red abalone. Likewise, the participation of the cytokine AbTNF-a protein and the group exclusively MEP ASD may eventually lead to the identification of resistance genes of X. californiensis.
CICESE
2013
Tesis de maestría
Español
Molina Carrillo, L. M. 2013. Expresión de genes inmunorrelacionados y de estrés térmico en abulón rojo, Haliotis rufescens, sintomático al síndrome de deshidratación. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.
CIENCIAS AGROPECUARIAS Y BIOTECNOLOGÍA
Aparece en las colecciones: Tesis - Acuicultura

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