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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/1320| Encapsidación del ARNm de la Granzima B de humano en partículas tipo virus del CCMV Encapsidación del ARNm de la Granzima B de humano en partículas tipo virus del CCMV | |
| Kee Whun Leo Dan Avila | |
| MARCO ANTONIO DE LEON NAVA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| CCMV, VLP, Granzima, Encapsidación, Apoptosis | |
| Las aplicaciones nanotecnológicas de los virus se ven involucradas en áreas tan diversas como el desarrollo de nanomateriales y la nanomedicina. Hoy en día se emplean estas partículas en una gran diversidad de formas que van desde su uso como nanocontendores para la protección del cargo hasta la entrega a regiones específicas de moléculas terapéuticas a tejidos de interés. En este estudio utilizamos una característica presente en varios virus, la capacidad de auto ensamblarse in-vitro,y encapsidar ARN de cadena sencilla (ssRNA), en el presente trabajo se enfocó en el uso de un ssRNA: ARN mensajero (ARNm) de la proteína pro-apoptótica GranzimaB (GzmB) de humano. La GzmB es una enzima proteolítica expresada principalmente en células asesinas naturales (NK) y linfocitos T citotóxicos (CTLs).Ésta se encarga de inducir apoptosis en células blanco que experimenten alteraciones fenotípicas, como células malignas o infectadas por patógenos intracelulares. En este estudio se utilizó la proteína de la cápside (CP) del virus de la clorosis moteada del caupí (CCMV) para formar partículas tipo virus (VLPs) y que tuvieran como cargo el ARNm de la Granzima B de humano. Tras la realización de diferentes ensayos de encapsidación, los resultados sugieren que la CP del CCMV es capaz de formar VLPs conteniendo el ARNm de la GranzimaB de humano. El análisis de viabilidad e inducción de apoptosis en células mononucleares de mamífero en co-cultivo con CCMV y su CP demuestra la biocompatibilidad del virus y su proteína con células humanas. The use of viruses for the development of nanotecnological applications can be foundin areas of research as diverse as nanomaterials and even nanomedicine. There have recently surged vast amounts of applications for these biological nanoparticles ranging from their use as nanocontainers for cargo protection to targeted delivery of therapeutic molecules to specific tissue. In this study we utilize a trait found in most viruses, the capability of in vitro self-assembly and single stranded RNA (ssRNA) encapsidation. In the work here presented we focus on the use of a specific ssRNA: messenger RNA (mRNA) of the pro-apoptotic human protein Granzyme B (GzmB).GzmB is a proteolytic enzyme mainly expressed in natural killer cells (NK) andcytotoxic T lymphocytes (CTLs). This protein is responsible for the induction of apoptosis in target cells exposing phenotypic alterations, such as malign cells or cellsinfected by intracellular pathogens. In this study we utilize the capsid protein (CP) from Cowpea Chlorotic Mottled Virus (CCMV) to assemble virus-like particles (VLPs) containing as cargo human Granzyme B mRNA. After tackling various encapsidation assays, results suggest that CCMV CP is capable of forming VLPs containing human Granzyme B mRNA. Cell viability and apoptosis induction analysis of mammal mononuclear cells co-cultured with CCMVand CP, independently, demonstrate virus and protein biocompatibility with human Cells. | |
| CICESE | |
| 2016 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Kee Whun Leo Dan Avila 2016. Encapsidación del ARNm de la Granzima B de humano en partículas tipo virus del CCMV. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 64 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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