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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/1354| Visualización de la F-actina en Trichoderma atroviride durante el crecimiento y daño mecánico Visualization of F-actin during growth and mechanical injury in Trichoderma atroviride | |
| Marisela Garduño Rosales | |
| Rosa Reyna Mouriño Pérez | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| F-actina, Trichoderma Atroviride, Daño mecánico | |
| El citoesqueleto de actina es esencial para muchos procesos importantes en las células eucarióticas. La actina está organizada en diferentes estructuras funcionales dependiendo de sus proteínas asociadas ABPs (del inglés, Actin Binding Proteins). En los hongos filamentosos, el citoesqueleto de actina está involucrado en el transporte de vesículas hacia zonas de crecimiento polarizado, en la formación de septos por anillos contráctiles y en la endocitosis por medio de parches. Adicionalmente, se ha demostrado que en diferentes organismos eucariotas la actina tiene un papel importante en la reparación de la membrana celular cuando ésta sufre daños. Para entender la organización de la actina en el hongo Trichoderma atroviride se utilizó el reportero Lifeact-GFP, y se analizó la dinámica y localización del citoesqueleto de actina durante el crecimiento y desarrollo, además de su reorganizacióndespués de daño mecánico a las hifas. Mediante microscopía confocal, se observó F-actina asociada al centro del Spitzenkörper. También encontramos un collar subapical de parches de actina, a una distancia constante del domo apical, así como, algunos parches de actina a lo largo de toda la región basal. Durante la formación de septos, una maraña de actina denominada SAT (del inglés, Septal ActomyosinTangle), fue observada durante varios minutos antes de cualquier signo de crecimiento de la membrana,la maraña coalesce formando un anillo contráctil que se constriñe para dar lugar al septo. Después de dañar con un bisturí el micelio de T. atroviride, se observó que pequeños parches de actina se van acumulando en el septo más cercano al sitio de herida. Estos septos son inicialmente taponeados por los cuerpos de Woronin para evitar la pérdida de citoplasma y la muerte celular. Por aproximadamente una hora solo se observan parches en el sitio donde emerge una nueva hifa, que es más delgada. Antes deque se recupere el nuevo sitio de crecimiento, se desarrolla un septo muy cerca del que fue taponeado. Solo en las hifas donde ocurre este fenómeno hubo recuperación. Una vez que las hifas nuevas hancrecido, se observaron cables de actina, principalmente alrededor del septo taponeado. Con lo anteriorse puede decir que la actina en T. atroviride tiene dos formas estructurales, cables y parches. Que están localizados principalmente en el Spitzenkörper, collar endocítico y septo. Actin cytoskeleton is essential for many important processes in all eukaryotic cells. Actin is organized indifferent functional structures depending on the associated Actin Binding Proteins (ABPs). In filamentousfungi, the actin cytoskeleton is involved in vesicles transport toward zones of polarized growth using actincables, septal formation using contractile rings and endocytosis using patches. Also it has been shownthat actin has an important role in cell membrane repair after injury in different eukaryotic organisms. In this work we visualized the organization and dynamics of the different actin structures and during mechanical injury recovery in mature hyphae of Trichoderma atroviride tagged with the reporter LifeactGFP. By confocal microscopy we observed F-actin associated to the core of Spitzenkörper. We also founda subapical collar of actin patches that is present after the apical dome. Some actin patches were presentin older areas of the hyphae. During septal formation an actin tangle (SAT) was observed several minutes before any sign of plasma membrane invagination, the tangle coalesced forming a contractile ring that was constricted to form the septum after the mycelium of T. atroviride was injured with a scalpel and Factin accumulated at the septum closest to the site of injury. Patches but not filaments were present in the apical dome until a new and thinner hypha grew from the septum. A few microns from the septum we observed the formation of a SAT and later on a CAR during the recovery process. Hyphae that did notproduce these structures were not able to recover and grow. The recovery of the F-actin associated tothe Spitzenkörper seems to take several hours. We conclude that all of the actin arrangements described in other organisms are present in T. atroviride. Actin seems to play an important role for the recovery of anew growth site after injury. | |
| CICESE | |
| 2016 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Garduño Rosales,M.2016.Visualización de la F-actina en Trichoderma atroviride durante el crecimiento y daño mecánico. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 62 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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