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Caracterización electrofisiológica de toxinas peptídicas del caracol marino Conus californicus en canales iónicos de calcio
Electrophysiological Characterization of peptidic Toxins of Marine Snail Conus californicus in Calcium Ion Channels 
Johanna Bernáldez Sarabia
Alexei Fedórovish Licea Navarro
Rogelio Arellano Ostoa
Acceso Abierto
Atribución
Conotoxinas, Venenos biológicos, Conus californicus, Ciencias del mar
Los caracoles marinos Conus californicus son una especie endémica de California y Baja California. De manera similar al resto del Género, C. californicus tiene un aparato venenoso especializado, que contiene una gran variedad de péptidos conocidos como conatoxinas. Se ha demostrado que estas conatoxinas son altamente selectivas a receptores y canales iónicos en Sistema Nervioso Central y Periférico en mamíferos. En los últimos años, algunas enfermedades como epilepsia, ataxia cerebral y migraña, entre otras, han sido asociadas al mal funcionamiento de canales de Ca2+ dependientes del voltaje. Para comprender la fisiopatológia de estas enfermedades, las investigaciones se han orientado preferente mente al estudio y desarrollo de nuevas moléculas moduladoras de canales iónicos como nuevas terapias farmacológicas. En este trabajo, se determinó que en el veneno de Conus  Californicus existen toxinas  que bloquean canales de  Ca2+ dependientes del voltaje. El efecto de las fracciones obtenidas por HPLC del veneno de estos organismos fue analizado electrofisiológicamente  en canales de Ca2+, empleando dos sistemas celulares. Primero, se realizó la transfección  de ARNm de cerebros de ratas en ovocitos de Xenopus laevis, y segundo, se realizó un cultivo de neuronas glanglionares de la raíz dorsal de ratas. En el primer sistema de los resultados demostraron que el veneno de C. californicus  contiene por lo menos una fracción, colectada en los primeros 15 minutos, con efecto modulador sobre las corrientes de   Ca2+ ya que se disminuye  en un 70%, seguido de una recuperación parcial de 45%. Esta fracción fue re-purificada y se obtuvieron dos subfracciones que corresponden a los minutos: 5-10 y 10-15. En este caso, la fracción 10-15, disminuyó la corriente de   Ca2+ en un 38% y mostró una disminución de la corriente en un 66%, con una recuperación de la corriente de un 80%. Los resultados obtenidos al emplear el segundo modelo biológico mostraron ser similares.
The marine snail conus californicus is an endemic specie from California and Baja California. Like all members of the conus Genus, C. californicus has conotoxins. Some individual peptides are selectively targeted to specific receptor or ion channel isoforms, including voltage-dependent channel subtypes from mammalia Central and Peripheral Nervious Systems. A number of disorders have been associated wiht malfunction of voltage-dependet calcium channels, for exple epilepsy, cerebellar ataxia, and migraine. Thus, calcium channels are crucial targets for pharmacological agents and discovery of novel drugs are subject of continuous research.In the present study, we determinated that in the venom of conus californicus there are toxins that blocks voltage-sensitive calcium channels. We purified different fractions of the venom of Conus californicus by HPLC. The fractionated venom was tested electrophysiologically on Ca2+ channels employing two celullar systems. The fist one, was expressend in Xenopus laevis oocytes, using purified rat brain mRNA, and the second one, was using adult rat dorsal root ganglio neurones. On the fist biological model, results demonstrated that the venom of C. californicus had at least one fraction collected in the first15 minutes, which caused a significant decrease of Ca2+ current (70%), that was partially reverted afther was (45%). This fraction was purified, and 2 further fractions were collected corresponfing to: 5-10 and 10-15 min. In this case, fraction 10-15, was able to decrease the Ca2+ current to 38%, with a current recovery after wash of 82%. We also analyze the individual minute 11 wich diminished the current of the Ca2+ cannels in 66% with a current recovery of 80%. We observe similar results using the second biological model.
CICESE
2008
Tesis de maestría
Español
Bernáldez Sarabia,J.2008.Caracterización electrofisiológica de toxinas peptídicas del caracol marino Conus californicus en canales iónicos de calcio.Tesis de Maestría en Ciencias.Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada,Baja California.122 pp.
MICROBIOLOGÍA
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