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Sistema eficiente para la expresión heteróloga de proteínas para la producción de VLPs
Bacillus subtillis as a system for the heterologous protein expression for the VLPs production
ERIKA LIS SOTELO BARRERA
RUBEN DARIO CADENA NAVA
Acceso Abierto
Atribución
VLP, CCMV, Bacillus subtilis, proteínas heterólogas
heterologous proteins
La expresión de proteínas recombinantes está enfocada a producir grandes cantidades de una proteína de interés de manera eficiente y económica para diversas aplicaciones en áreas como la biomedicina. Bacillus subtilis es uno de los sistemas de expresión recombinante de proteínas, considerada como organismo GRAS por la FDA, debido a que carece de lipopolisacáridos, otra característica importante de este organismo es su gran capacidad para secretar proteínas hacia el medio, este proceso es mediado por péptidos señales unidos al extremo amino terminal de las proteínas. Actualmente, es de gran interés la producción de las proteínas estructurales que conforman las cápsides de los virus, por su capacidad de autoensamblarse en nanopartículas y sus posibles aplicaciones en nanotecnología y nanomedicina. Por otro lado uno de los virus que han mostrado ser de gran interés biotecnológico es el virus moteado clorótico del caupí (CCMV). Por lo cual en este proyecto se usó del sistema de expresión Bacillus subtilis para la expresión y secreción al medio de cultivo, de las proteínas de la cápside (CP) del virus CCMV. Aún cuando se logró expresar la proteína en B. subtilis ésta no fue secretada eficientemente al medio en las condiciones estudiadas.
The recombinant protein expression focuses on the production of a specific protein efficiently and in large quantities, it is a technology of economic impact and diverse applications in different areas, such as biomedicine. A recombinant expression systems is the Bacillus subtilis bacteria, considered as a GRAS (Generally Recognized as Safe) organism by the FDA, because it lacks lipopolysacharides. Another characteristic of this organism is it´s great capacity to secrete proteins to the medium, this process is mediated by signal peptides in the amino terminus of the protein. Currently, it is of great interest the production of virus capsides structural proteins, because of their capacity to autoensamble in nanoparticles and their possible applications in nanotechnolgy and nanomedicine. Among the virus showing different potential applications there is Cowpea Chlorotic Mottle Virus (CCMV). In this work Bacillus subtilis was used as expression system to study the expression and protein secretion for the production of VLP´s constituted by CCMV capsid proteins (CP). Our results show that is possible to express the CCMV CP in B. subtilis but the efficiency of secretion to the medium is very low under our expression conditions.
CICESE
2018
Tesis de maestría
Español
Sotelo Barrera, E.L. 2018. Sistema eficiente para la expresión heteróloga de proteínas para la producción de VLPs. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 55 pp.
OTRAS
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