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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2372| Aislamiento y caracterización de cianobacterias marinas productoras de compuestos de interés biomédico Isolation and characterization of marine Cyanobacteria with biomedical interest | |
| Alejandra Torres Ariño | |
| Elizabeth Ponce Rivas | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Cianobacterias marinas, Antimicrobianos, Toxicidad, Potencial biomédico, Marine cyanobacteria, Antimicrobial activity, Toxicity, Biomedical potential | |
| En el curso de la evolución, los microorganismos que habitan el ambiente marino se han adaptado excelentemente a condiciones extremas; tales como altas concentraciones de sal, temperaturas extremas tanto altas como bajas, alta presión y concentraciones baja de nutrimentos. Dichas condiciones extremas requieren de estrategias adaptivas únicas que conllevan la formación de productos naturales, con estructuras y características diferentes a las encontradas en organismos terrestres. Estos productos naturales marinos tienen un enorme potencial para diferentes aplicaciones biotecnológicas. En este trabajo se presentan las metodologías empleadas para el aislamiento, la caracterización morfológica y la estandarización de las técnicas moleculares de cepas de cianobacterias marinas de ambientes de costa halofílica, productora de compuestos de interés biomédico. En este sentido se caracterizaron cianobacterias productoras de antibióticos y se evaluó la toxicidad de las mismas. Para la preparación de los extractos de utilizaron dos estrategias: los primeros se obtuvieron con la mezcla de CH2C12:CH3OH (1:1) y los segundos, a partir de dicha mezcla se eluyeron en una columna de sílica gel con CH2C12 seguido de CH3OH. A partir de esta última estrategia se evaluaron 13 cepas de microorganismos tanto Gram (+) como Gram (-) y dos cepas de levadura. Con el aislamiento de géneros como Oscillatoria, Phormidium, Synechococcus, Synechocystis, Lyngbya y Spirulina, se dio inicio a la colección de cianobacterias marinas del departamento de biotecnología Marina del CICESE. Sólo con la segunda estrategia de extracción se obtuvieron resultados de actividad antimicrobiana en Pseudomonas aeruginosa con fracciones de CH3OH y CH2C12. Varias de las fracciones en ambos disolventes fueron tóxicos para nauplios de Artemia. El empleo de oligonucleótidos específicos para cianobacterias permitió amplificar un fragmento de 2,100 pb correspondiente al gen que codifica para el ARNr 16S, la región intergénica (ITS) y el fragmento inicial del gen que codifica para el ARNr 23S. Además se diseñaron oligosnucleótidos que permitirán, por un lado, la amplificación de dos regiones variables del gen que codifica para el ARNr 16S y por otro, la región ITS. Lo anterior permitirá corroborar la clasificación taxonómica, así como inferir en las relaciones filogéticas más cercanas entre cepas de cianobacterias. In thecourse of evolution, the microorganisms living in the marine environment have excellently adapted to the extreme marine environmental conditions; such as high salt concentration, extreme low or high temperature, high pressure (i.e in thermal vents) and low nutrient concentrations. These extreme conditions require unique adaptation strategies leading to new natural products, which have different structures to those found in terrestrial organisms. These marine products have an enormous potential for different biotechnological applications. In the present work, I present the methodologies for isolation, morphological characterization and molecular techniques standardization of marine cyanobacterial strains. I focus on cyanobacterial from halophylic environments and with biomedical potential. Isolation of cyanobacteria strains belonging to the genera: Oscillatoria, Phormidium, Synechococcus, Synechocystis, Lyngbya and Spirulina, I started the cyanobacterial collection at the Biotechnology department of CICESE. In this sense, cyanobacterial characterization and toxicity evaluation were done. To obtain cianobacteria extracts two strategies were carried out; one with CH2C12:CH3OH (1:1). The second strategy consisted of an extraction with CH2C12:CH3OH (1:1) followed by an elution in silica gel columns with CH2C12 and CH3OH. The extracts were tested to find antimicrobial activity using thirteenth strains of both Gram (+) and Gram (-), and two strains of yeast. Only in the case of the second strategy, Pseudomonas aeruginosa was susceptible to most of CH3OH extracts. Klebsiella pneumoniae was sensible to both CH2C1 and CH3OH extracts. Most of the cyanobacterial extracts were toxic against Artemia nauplii. Specific primers for cyanobacteria allowed the amplification of 2,100 bp DNA fragments which included the 16S rRNA gene as well as a part of the internal transcribed spacer (ITS) and the initial part of the 23S rRNA gene. Aditional primers were designed to amplify two variable regions of the 16S rRNA gene and the ITS region. Using these fragments, it could be possible to confirm the taxonomic classification to distinguish and establish relationships between genera and well-resolved species. | |
| CICESE | |
| 2001 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Torres Ariño, A.2001.Aislamiento y caracterización de cianobacterias marinas productoras de compuestos de interés biomédico.Tesis de Maestría en Ciencias.Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.94 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias |
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