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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2442| Caracterización fenotípica y funcional de leucocitos del tiburón Heterodontus francisci Phenotypic and functional characterization of shark leukocytes Heterodontus francisci | |
| DANIEL FERNANDEZ NOLASCO | |
| MARCO ANTONIO DE LEON NAVA LUIS DONIS MATURANO | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Inmunidad innata, trampas extracelulares, fagocitosis, evolución. Innate immunity, extracellular traps, phagocytosis, evolution | |
| El estudio comparativo del sistema inmunológico en especies distintas al Homo sapiens nos ha permitido descubrir nuevos mecanismos de la inmunidad y comprender los ya existentes, con la finalidad de generar conocimientos nuevos que, entre otras ventajas, podrían derivar en estrategias terapéuticas útiles en el área biomédica. Una de las formas de vida ancestrales para estudiar el sistema inmunológico es el tiburón, un organismo en el que se han identificado moléculas del sistema inmune adaptativo como el receptor de células B (BCR) y células T (TCR), el complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) y el sistema activador de la recombinación (RAG), además de poseer un tipo de inmunoglobulinas (IgNAR) con propiedades únicas como alta solubilidad y estabilidad biofísica. Con la finalidad de entender mejor la inmunología de este organismo, el presente trabajo aborda aspectos del fenotipo y función en células del sistema inmune innato del tiburón Heterodontus francisci, una especie con un origen evolutivo de aproximadamente 250 millones de años. Después de la extracción de sangre y el aislamiento de leucocitos, se determinó mediante citometría de flujo que existen anticuerpos monoclonales para proteínas de mamífero que generan una reacción cruzada contra antígenos de tiburón, observando una relación estímulo-fenotipo dada por un aumento en la detección de proteínas asociadas con linfocitos B (CD19), fagocitos especializados (CD206) y una proteína asociada con linfocitos T (CD5) posterior a la exposición con tres especies de bacterias (Escherichia coli, Staphylococcus aureus y Vibrio harveyi). Respecto a los ensayos de la capacidad de engullimiento de leucocitos de tiburón evaluados nuevamente por citometría de flujo, se evidenciaron diferencias en relación con el tamaño y granularidad de las regiones leucocitarias y el estímulo adicionado, observamos que E. coli es un fuerte inductor de los procesos de internalización. Finalmente, utilizando microscopía de epifluorescencia, se observó en los leucocitos la inducción de estructuras semejantes a trampas extracelulares dependientes del estímulo con S. aureus; hipotetizamos que este efecto está mediado, como en los mamíferos, por algún tipo de TLR, fenómeno que sugiere que puede ser un mecanismo de defensa sumamente antiguo y conservado. La respuesta celular en leucocitos de H. francisci incluye la expresión de proteínas de membrana que brindan identidad a los leucocitos y la activación de funciones innatas... Comparative studies between humans (Homo sapiens) and other species have led to the discovery and understanding of new and existing mechanisms of the immune system. These discoveries help unveil and solve current issues, and allow the generation of knowledge that could lead to new therapeutic strategies in the biomedical field. Sharks are one of the most ancient vertebrate subclasses in which to study the immune system, an organism with adaptive immune system molecules like B (BCR) and T (TCR) cells receptor, major histocompatibility complex (MHC) and the recombination-activating gene (RAG), also they have a special type of immunoglobulins (IgNAR) with unique properties including high solubility and biophysical stability. In order to have a better understanding of shark immunology, this work aims to study the functional and phenotypic aspects of innate immune system cells of the Heterodontus francisci shark, a species with approximately 250 million years of evolutionary divergence. In the present study, we detected a possible cross reactivity between monoclonal antibodies against mammal proteins and shark antigens using flow cytometry. We observed a phenotype-stimuli relationship characterized by an increase of proteins associated to B lymphocyte (CD19), professional phagocyte (CD206) and T-B lymphocyte (CD5) populations after bacterial stimulation (Escherichia coli, Staphylococcus aureus y Vibrio harveyi). Regarding leukocyte engulfment capacity assessed by flow cytometry, it was shown that there are many differences between size and granularity between leukocyte regions and the added stimuli; it was observed that E. coli is a strong inductor of internalization processes. Finally, we observed Extracellular Trap-like (ETs) structures in shark leukocytes by epifluorescence microscopy. These ETs were dependent on S. aureus stimuli, and we infer that this mechanism is mediated by some type of TLR, similar to mammals. This suggests that ETs may be a very ancient and conserved mechanism. The cellular response in H. francisci leukocytes includes membrane protein expression that provides identity to leukocytes and specific innate function activation; this response is dependent and varies according to the bacterial stimuli to which cells are exposed. In many cases, the immune response keeps similarities with stimulus-response processes observed in mammals, suggesting that there are evolutionarily conserved immune elements and mechanisms between two very distant sp | |
| CICESE | |
| 2018 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Fernández Nolasco, D. 2018. Caracterización fenotípica y funcional de leucocitos del tiburón Heterodontus francisci. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 42 pp. | |
| INMUNOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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