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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2495| Aislamiento y caracterización de toxinas Cry de Bacillus thuringiensis con actividad citócida sobre células de cáncer cervicouterino in vitro e in vivo | |
| Gretel Mendoza Almanza | |
| Jorge Olmos Soto | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Bacillus thuringiensis | |
| Bacillus thuringiensis, es una bacteria gram positiva, considerada cosmopolita. Formadora de esporas que, durante su síntesis una mezcla de proteínas denominadas δ-endotoxinas, conocidas también como proteínas Cry y Cyt, son depositadas como inclusiones intracelulares en un segundo compartimento ubicado en posición paraesporal. Estas inclusiones paraesporales tienen un alto valor como proteínas insecticidas para su uso en aerosoles y en cultivos transgénicos. Los genes cry son muy diversos. Su distribución en la naturaleza esta directamente relacionada con la distribución de diferentes especies de insectos. Por lo tanto, el territorio mexicano resulta atractivo para estudiar genes cry. Recientemente se han encontrado algunas cepas de B. thuringiensis que producen proteínas de inclusión citotóxicas para cultivos celulares de mamíferos, incluyendo, líneas celulares de cáncer humano, a las que se ha agrupado en una nueva familia de endotoxinas denominado Parasporinas. En este estudio se aislaron 28 cepas de B. thuringiensis de la región Ensenada-Tijuana, productoras de cristales, los cuales fueron caracterízados morfológicamente. Las proteínas Cry contenidas en los cristales fueron caracterizadas molecularmente y sometidas a un análisis de actividad tóxica tanto en larvas de insectos como en diferentes células de humano. Se identificaron dos toxinas no hemolíticas, provenientes de las cepas 6-1 y 10-2 con actividad citócida importante en tumores inducidos en ratones nude con células HeLa originarias de células de cáncer cervicouterino con Virus del Papiloma Humano (VPH) tipo 18, que sumado al VPH 16 son los agentes causales del 70% de los casos de cancer cervicouterino en el mundo. Las toxinas provenientes de 6-1 y 10-2, eliminan tumores inducidos de 0.8 a 1.4 cm a partir de una concentración de 10 µg/ml, aparentemente por apoptosis. Bacillus thuringiensis, is a gram-positive bacteria, considered cosmopolitan. Spore-forming, which during its synthesis, a mixture of proteins called δ-endotoxins, also know as Cry and Cyt proteins are deposited as intracellular inclusions in a second compartment located in parasporal position.These parasporal inclusions have a high value as insecticidal proteins for use in aerosols, and in transgenic crops. The cry genes are very diverse. Its distribution in nature is directly related to the distribution of different species of insects. Therefore, the Mexican territory is attractive to study genes cry. Recently we have found some strains of B. thuringiensis that produce cytotoxic proteins for mammalian cell culture, including human cancer cell lines, which have been grouped in a new family of endotoxins called Parasporinas. In this study, we isolated 28 strains of B. thuringiensis from Ensenada-Tijuana region, crystals producers. Which were characterized morphologically. The Cry proteins contained in the crystals were moleculary characterized and subjected to an analysis of toxic activity in both insect larvae and in different human cells. We identified two toxins from strains 6-1 and 10-2 respectively with significant cytocidal activity on induced tum,ors on nude mice HeLa cells originating in cervical cancer cells with human papillomavirus (HPV) type 18, which together with HPV 16 are the causative agents of 70% of cervical cancer cases worldwide. Yhe toxin from 6-1 and 10-2, removed induced tumors between 0.8 to 1.4 cm of size from a concentration of 10 mg /ml, apparently by apoptosis. | |
| CICESE | |
| 2011 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| Mendoza Almanza, G.2011.Aislamiento y caracterización de toxinas Cry de Bacillus thuringiensis con actividad citócida sobre células de cáncer cervicouterino in vitro e in vivo.Tesis de doctorado en ciencias.Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.139 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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