Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2731| Desarrollo de un método de detección para VIH-1 por medio de hemoaglutinación con fragmentos de anticuerpo de tiburón Development of a Detection Test for HIV-1 with fragments of shark antibodies by hemagglutination | |
| Amanda Dávila Lezama | |
| Alexei Fedorovish Licea Navarro | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| VIH1,vNAR, Proteína p24, Hemoaglutinación, HIV, p24 protein | |
| El virus de inmunodeficiencia humana (VIH) es conocido como el agente causal del Síndrome de Inmunodeficiencia Adquirida (SIDA). Esta enfermedad se ha convertido en una de las más importantes a nivel mundial. Por lo tanto, es esencial una detección temprana y eficiente para controlar su dispersión. Los métodos que se utilizan para el diagnóstico son por medio de pruebas serológicas, sin embargo, las desventajas de estas pruebas, son que requieren una minuciosa preparación de muestras, personal capacitado y consumen mucho tiempo, así mismo, se alarga la obtención de los resultados. Con base a lo anterior, en el presente trabajo se le da énfasis a la construcción de una proteína quimérica recombinante con capacidad de reconocer anticuerpos de VIH-1 por medio de hemoaglutinación. Anteriormente, por medio de técnicas de Despliegue en Fagos se obtuvo un fragmento de anticuerpo de tipo vNAR de una biblioteca inmune de tiburón con capacidad de reconocimiento a la proteína glicoforina A exclusiva de los eritrocitos, con ayuda de técnicas en biología molecular se obtuvo la secuencia de vNAR y la secuencia de la proteína p24 formadora de la capside de VIH-1 y se generó un gen quimérico con estas dos secuencias. Así mismo, este gen se expresó, generando una proteína quimérica recombinante con capacidad de reconocer a la proteína glicofonina A y ser reconocida por anticuerpos anti-VIH en suero humano en ensayos de hemoaglutinación. 38 muestras de sueros de pacientes seropositivos se sometieron a pruebas de hemoaglutinación con la proteína quimérica recombinante en donde los resultados fueron favorables ya que dicha proteína presentó actividad de aglutinación, en el 100% de las muestras analizadas. Por las características que presenta la proteína quimérica recombinante se convierte en un candidato ideal para ser utilizando como un método de detección del virus de VIH-1 como una prueba rápida con resultados precisos en el menor tiempo posible, con una interpretación simple y accesible a la población. The Human Immunodefiiciency Virus (HIV) is know as the casual agent of the Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS). This illnesse has become one of the most important at world wide level, therefore it is essential an early and efficient detection to control its spreading. The diagnostic methods are by serological test, but, the disadvantages of these tests are that they requiere a meticulous preparation of samples, trained personnel, and they consume time, also, to obtain a results takes a long time. With the aforementioned, in this work, we have given emphasis to the development of a quimeric recombinant protein with the capability to recognize antibodies of HIV-1 by hemagglutination. By Phage Display techniques it was posible to obtain an antibody fragment type vNAR of a non immune shark library, with the capacity to recognize the glicophorin A protein exclusive of the red cells membane, with the help of molecular biology techniques, the sequence of vNAR was obtained, and the protein p24 sequence developmer of the capside of HIV-1, a quimeric gen was obtained with these two sequences. Therewith, this quimeric gen was expressed and a recombinant quimeric protein was produced, with capability to recognize the glicophorin A protein and at the same time being recognized by anti-HIV-1 antibodies in human serum in hemagglutination assays. 38 serum samples of positive patients were subjet to hemagglutination tests with the quimeric protein where the results were favorable, because such protein presented aglutination activity on 100% of the analized samples. By the caracteristics that the quimeric protein presents turns out that this is an ideal candidate to be used as a detection method for the HIV-1 virus as a fast test and with precise results on the less time posible, with a simple interpretation and accesible for the population. | |
| CICESE | |
| 2009 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Dávila Lezama, A.2009.Desarrollo de un método de detección para VIH-1 por medio de hemoaglutinación con fragmentos de anticuerpo de tiburón.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.82 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias |
Cargar archivos:
| Fichero | Tamaño | Formato | |
|---|---|---|---|
| 179301.pdf | 18.65 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |