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Obtención de abzimas de tiburón con actividad corismato mutasa
Obtaining abzymes from shark with chorismate mutase activity
Haydee Patricia Lara Castillejos
Alexei Fedorovish Licea Navarro
Joel Osuna Quintero
Acceso Abierto
Atribución
Abzima,Corismato mutasa, IgNAR, Abzyme, Chorismate mutase
En 1986 Schultz y Lerner demostraron que es posible la generación de anticuerpos con actividad catalítica. Debido a la actividad catalítica de estos anticuerpos se les denomina abzimas. Los tiburones son los organismos más primitivos que poseen anticuerpos como parte de su sistema inmune, entre los que destacan las IgNAR. Las IgNAR poseen la particularidad de unirse al antígeno a través de solamente un dominio variable (vNAR). El vNAR es estable, soluble y presenta un CDR3 largo y variable. Por otro lado, la corismato mutasa es una enzima esencial para la producción de los aminoácidos aromáticos y solamente se encuentra en bacterias, algas, hongos y plantas. Se ha explorado la actividad corismato mutasa de anticuerpos, pero no se ha logrado superar la actividad de las enzimas naturales. Debido a las ventajas de usar anticuerpos de tiburón vNAR y apoyados en los estudios previos de abzimas con actividad corismato mutasa, analizamos la actividad corismato mutasa de fragmentos vNAR de una biblioteca no inmune del tiburón Heterodontus francisci. Logramos aislar de la biblioteca de tiburón, 92 clonas con el inserto de vNAR. Dos clonas son capaces de reconocer al antígeno y demostraron actividad catalítica in vitro.
In 1986 Schultz and Lerner demostrated that it is posible the generation of antibodies with catalytic activity. Due to the enzymatic activity of these antibodies, they have been named abzymes. Sharks are the most primitive organisms that exhibit antibodies in their immune system, among them IgNAR. IgNAR are remarkably because they join the antigen through a single variable domain (vNAR). The vNAR, is stable, soluble and it shows a long and variable CDR3. On the other hand, chorismate mutase is an enzyme essential for the production of aromatic amino acids and it is present only in bacteria, algae, fungi and plants. The activity chorismate mutase of antibodies has been explored, but it has been imposible to overcome the activity of natural enzymes. Due the advantages of using vNAR antibodies from shark and supported with previous studies on abzymes with chorismate mutase activity, we analyzed the chorismate mutase activity of vNAR fragments from a non-immune library from the shark Heterodontus francisci. We managed to isolaated 92 clones with the vNAR insert from the shark library. Two clones are able of recognizing the antigen and they show catalytic activity in vitro.
CICESE
2009
Tesis de maestría
Español
Lara Castillejos, H. P.2009.Obtención de abzimas de tiburón con actividad corismato mutasa.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.71 pp.
MICROBIOLOGÍA
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