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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2735| Obtención de anticuerpos tipo vNAR que reconocen y neutralizan venenos de alacrán Obtention of type vNar antibodies wich recognizes and neutralizes scorpion venoms | |
| Diego Alonso Montoya Bonillas | |
| Alexei Fedorovish Licea Navarro | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Alacranismo, Androctonus australis, Leiurus quinquestriatus, Veneno de alacrán,vNAR, Heterodontus franscisci, Scorpionism | |
| El alacranismo es un grave problema de salud pública en algunos países. Se presenta en muchas regiones en el mundo como en el Norte y Sur de África, India, Medio Oriente, Turquía, Francia, España, Mongolia, China, Asia Central y en América, en donde México tiene el mayor índice de alacranismo a nivel mundial. El método tradicional de producción de antivenenos a partir de suero de animales inmunizados ha resultado ser un proceso muy costoso y lento en comparación con las nuevas tecnologías de producción de anticuerpos recombinantes, en las cuales se puede llevar a cabo la selección de anticuerpos que reconocen el antígeno de interés, a partir de bibliotecas peptídicas obtenidas por despliegues en fagos. Por medio de HPLC (High Performance Liquid Chromatography), se aislaron fracciones de los venenos de los alacranes Androctonus australis y Leiurus quinquestriatus, para ser utilizadas en ensayos in vivo en ratones, con la finalidad de detectar la fracción letal y utilizar esta fracción con antígeno. Para seleccionar fragmentos de anticuerpo tipo vNAR específicos contra las fracciones letales de los venenos de Androctonus australis y Leiurus quinquestriatus, se utilizó una biblioteca formícida no inmune de un tiburón Heterodontus francisci. Se aislaron fragmentos de anticuerpo tipo vNAR desplegados en bacteriófagos, y se seleccionaron los que presentaron mayor reconocimiento por el antígeno en ensayos de ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), para posteriormente probar su efecto neutralizante in vivo en ratones. Los ensayos de neutralización mostraron un retraso considerable en el tiempo de muerte de los organismos, así como sobrevivencia en algunos casos, lo que nos permite concluir que losvNAR aislados tienen actividad neutralizante. Scorpionism is a great public health problema in some countries. Many regions in the world present it as in Northern and Southern Africa, India, Middle East, Turkey, France, Spain, Mongolia, China, Central Asia and America. Mexico has the greatest scorpionism rate worldwide. The traditional method for antivenin production from animal serum has resulted very costly and time consuming in comparison with the newest technologies of recombinant antibody production that appeared in the last few years, in which antigen binding antibody selection can be performed starting from peptidic libraries obtained by phage display technology. By means of HPLC (High Performance Liquid Chromatography), we isolated from Androctonus australis and Leiurus quinquestriatus venoms, individual fractions and then they were used for in vivo assays with mice in order to detect the lethal fraction. These are the antigens. We used a non-immune fasmicid library from the shark Heterodontus francisci in order to select specific vNAR antibody fragments against the lethal fractions from Androctonus australis and Leiurus quinquestriatus venoms. We have isolated several clones per venom, containing the vNAR fragment that recognizes the venom in ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay). And potentially, this vNAR fragments neutralizes the toxic effect of the lethal fraction of the two scorpion venoms. The neutralization assays showed a considerable delay in the time of death in the organisms, and even survival was encountered in some cases. That data allows us to conclude that the isolated vNAR fragments have a neutralization activity. | |
| CICESE | |
| 2009 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Montoya Bonillas, D.A.2009.Obtención de anticuerpos tipo vNAR que reconocen y neutralizan venenos de alacrán.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.87 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias |
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