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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3319| El papel de la proteína RHO-3 durante el desarrollo celular de Neurospora crassa The role of the RHO-3 protein during the cell development of Neurospora crassa | |
| Martha María Ornelas Llamas | |
| ERNESTINA CASTRO LONGORIA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| GTPasas, Polaridad, Neurospora crassa, RHO-3 GTPases, Polarity, Neurospora crassa, RHO-3 | |
| Las GTPasas monoméricas de la familia Rho actúan como proteínas de señalización clave para el establecimiento y mantenimiento de la polaridad celular y otros procesos esenciales para la célula. Estas funcionan como interruptores moleculares al ciclar entre un estado inactivo unido a guanosín difosfato (GDP) y un estado activo unido a guanosín trifosfato (GTP), lo cual está altamente regulado. En su conformación activa, las Rho GTPasas interactúan con proteínas efectoras para provocar una variedad de respuestas intracelulares y mediar una diversidad de procesos como la morfogénesis, división celular, remodelación del citoesqueleto de actina, tráfico vesicular y la dinámica de los microtúbulos. Rho3 es una GTPasa de la familia Rho exclusiva de hongos, la cual participa en la polaridad celular de levaduras al regular la organización del citoesqueleto de actina y la exocitosis. Sin embargo, la información acerca de su función en hongos filamentosos es escasa. En este trabajo se estudió el papel de RHO-3 en el desarrollo del hongo filamentoso modelo Neurospora crassa. Particularmente, se analizó el efecto de la eliminación de rho-3 en la morfogénesis celular, donde los resultados demostraron que la cepa que carece de este gen tiene graves defectos en la tasa de crecimiento, longitud de hifas áreas, conidiación y en el desarrollo sexual; además de alteraciones en la distancia entre septos. El mantenimiento de la organización del Spitzenkörper también se ve afectado en la cepa que carece de rho-3. Adicionalmente, se determinó la localización subcelular de RHO-3 mediante la fusión de la proteína verde fluorescente (GFP) en el extremo amino-terminal de RHO-3. El análisis por microscopía confocal reveló que esta proteína se localiza en la región externa del Spitzenkörper, en la membrana plasmática desde la región II hasta principios de la región III y en septos de hifas maduras, por lo que se sugiere que RHO-3 participa en la formación de estos. Además, análisis por microscopía confocal de la co-expresión de GFP-RHO-3 con la glucano sintasa 1 y la quitina sintasa 1 marcadas con la proteína fluorescente roja, demostraron que RHO-3 se asocia con las macrovesículas de la región externa del Spitzenkörper. Esta información sugiere que la GTPasa RHO-3 aunque no es esencial para el crecimiento polarizado de las hifas, juega un papel importante en el desarrollo de Neurospora crassa. The Rho family of monomeric GTPases act as signaling proteins for the establishment and maintenance of cell polarity and other essential cellular processes. They function as molecular switches by cycling between an inactive GDP-bound conformation and an active GTP-bound conformation, which is highly regulated. In the GTP-bound conformation, the Rho GTPases are able to interact with effector proteins to induce a variety of intracellular responses and mediate various processes including morphogenesis, cell division, actin cytoskeleton re-organization, vesicular trafficking and microtubule dynamics. Rho3 is a GTPase of the Rho family exclusive of fungi involved in regulating cell polarity in yeast, by controlling polarized exocytosis and the organization of the actin cytoskeleton. However, few studies have been performed about its function in filamentous fungi. In this study, we investigated the role of RHO-3 in the development of the model filamentous fungus Neurospora crassa. In particular, we analyze the phenotypic effect of deletion of rho-3, and the results revealed that the rho-3 null cells showed serious defects in growth rate, aerial hyphae length, conidia production and sexual development; besides alterations in the distance between septa. The maintenance of the organization of the Spitzenkörper is also affected in absence of the rho-3. In addition, the subcellular localization of RHO-3 was determined by the fusion of the green fluorescent protein (GFP) at the N-terminus of RHO-3. The confocal microscopy analysis revealed that this protein is localized in the outer region of the Spitzenkörper, in the plasma membrane from region II to the beginning of region III and in septa of mature hyphae, suggesting that RHO-3 participates in septum formation. Furthermore, confocal microscopy analysis of the co-expression of GFP-RHO-3 with glucan synthase 1 and chitin synthase 1 labeled with the red fluorescent protein, demonstrated that RHO-3 associates with macrovesicles of the external region of the Spitzenkörper. Taken together, our results suggest that the GTPase RHO-3, although is not essential for polarized growth of hyphae, plays an important role in the cell development of Neurospora crassa. | |
| CICESE | |
| 2020 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Ornelas Llamas, M.M. 2020. El papel de la proteína RHO-3 durante el desarrollo celular de Neurospora crassa. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 59 pp. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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