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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3643| Estudio in vitro de la respuesta celular e inmunotoxicidad de macrófagos expuestos subcrónicamente a nanopartículas de óxidos metálicos In vitro study of the cellular response and immunotoxicity of macrophages exposed subchronically to metal oxide nanoparticles | |
| Melissa Isabel Gutiérrez Araujo | |
| KARLA OYUKY JUAREZ MORENO | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| macrófagos, nanopartículas de ZnO, nanopartículas de CuO, exposición subcrónica, inmunotoxicidad, nanotoxicología macrophages, ZnO nanoparticles, CuO nanoparticles, subchronic exposure, immunotoxicity, nanotoxicology | |
| Las nanopartículas de ZnO (ZnO-NPs) han recibido especial atención en los últimos años en el área de la nanocosmética, y sus aplicaciones en el área de la nanomedicina continúan en exploración; Sin embargo, diversas evidencias indican que la exposición constante de algunos organismos a las ZnO-NPs puede provocar inmunotoxicidad. Por otro lado, las nanopartículas de CuO (CuO-NPs) han sido utilizadas en el área de la microelectrónica, y en distintos modelos biológicos se ha observado que la exposición a estas nanopartículas puede causar genotoxicidad. Múltiples investigaciones han demostrado que algunos nanomateriales tienen propiedades inmunomoduladoras que pueden derivar en la disfunción del sistema inmunológico, provocando inflamación. El objetivo de este estudio es evaluar el efecto de la exposición subcrónica de ZnO-NPs y CuO- NPs a concentraciones subtóxicas en la línea celular de macrófagos RAW264.7, células con capacidad fagocítica que interactúan inicialmente con nanomateriales que ingresan al organismo y tienen funciones fundamentales para el adecuado funcionamiento del sistema inmunológico. Para cumplir con el objetivo, fue llevada a cabo la caracterización de las ZnO-NPs y CuONPs y el mantenimiento del cultivo de la línea celular de macrófagos RAW264.7. Posteriormente, fue estudiado el efecto de la exposición aguda y subcrónica a concentraciones subtóxicas de ZnO-NPs y CuONPs en la proliferación celular mediante un ensayo colorimétrico y la morfología de los macrófagos por microscopía óptica, también fue determinada la concentración de especies de oxígeno altamente reactivas (ROS) a través de fluorimetría y nitritos mediante el ensayo de Griess. El efecto en el tamaño y la complejidad relativa de macrófagos expuestos subcrónicamente a concentraciones subtóxicas de ZnO-NPs fue evaluado por citometría de flujo; mientras que cambios en el potencial de membrana mitocondrial y en los niveles de iones Zn2+ fueron visualizados a través de microscopía confocal láser, y la expresión relativa de genes específicos fue evaluada mediante qPCR. La caracterización de ZnO-NPs y CuO-NPs sugiere un tamaño promedio superior al reportado por el proveedor, así como alta agregación. La exposición subcrónica a CuO-NPs causa citotoxicidad a bajas concentraciones (2-8 μg/mL), evidenciando su potencial inmunotóxico. La viabilidad celular de macrófagos expuestos a ZnO-NPs de forma aguda y subcrónica evidenció alteraciones en los niveles de ROS, respuesta hormética, así ... ZnO nanoparticles (ZnO-NPs) have received special attention in recent years in the area of nanocosmetics, and their applications in the area of nanomedicine continue to be explored; However, various evidences indicate that constant exposure of some organisms to ZnO-NPs can cause immunotoxicity. On the other hand, CuO nanoparticles (CuO-NPs) have been used in the area of microelectronics, and in different biological models it has been observed that exposure to these nanoparticles can cause genotoxicity. Multiple investigations have shown that some nanomaterials have immunomodulatory properties that can lead to dysfunction of the immune system, causing inflammation. The objective of this study is to evaluate the effect of subchronic exposure of ZnO-NPs and CuO-NPs to subtoxic concentrations in the macrophage cell line RAW264.7, cells with phagocytic capacity that initially interact with nanomaterials that enter the organism and have functions essential for the proper functioning of the immune system. To cover the objective, the characterization of the ZnO-NPs and CuO-NPs, and the maintenance of the culture of the RAW264.7 macrophage cell line were carried out. Subsequently, the effects of acute and subchronic exposure to subtoxic concentrations of ZnO-NPs and CuO-NPs on cell proliferation was studied utilizing a colorimetric assay, on macrophages morphology by light microscopy, the concentration of species of highly reactive oxygen (ROS) through fluorimetry and on nitrites concentration through the Griess test were evaluated. The effect on the size and relative complexity of macrophages exposed subchronically to subtoxic concentrations of ZnO-NPs was also evaluated by flow cytometry; while changes in the mitochondrial membrane potential and the levels of Zn2+ ions were visualized through confocal laser microscopy, and the relative expression of specific genes was evaluated by qPCR. The characterization of ZnO-NPs and CuO-NPs suggests an average size higher than that reported by the supplier, as well as high aggregation. Subchronic exposure to CuO-NPs causes cytotoxicity at low concentrations (2-8 μg/mL), evidencing its immunotoxic potential. The cellular viability of macrophages exposed to ZnO-NPs acutely and subchronically showed alterations in ROS levels, hormetic response, as well as the formation of multinucleated giant cells in a manner dependent on the physicochemical properties, the concentration of ZnO-NPs, and time. of exposition. No alterations ... | |
| CICESE | |
| 2021 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Gutiérrez Araujo, M.I. 2021. Estudio in vitro de la respuesta celular e inmunotoxicidad de macrófagos expuestos subcrónicamente a nanopartículas de óxidos metálicos. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 113 pp. | |
| RESISTENCIA DE MATERIALES | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Nanociencias |
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| tesis_Melissa Isabel Gutiérrez Araujo_23 nov 2021_BIB_1.pdf | Versión completa de la tesis | 7.02 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |