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Síntesis de nanopartículas de oro con morfología de cubos cóncavos y su influencia in vitro en la viabilidad y morfología de osteoblastos
Synthesis of gold nanoparticles with morphology of concave cubes and their effects on the viability and morphological changes of osteoblasts
Williams de Jesús Jiménez Martínez
KARLA OYUKY JUAREZ MORENO
JOSE MANUEL ROMO HERRERA
Acceso Abierto
Atribución
nanopartículas de oro, osteoblastos, nanocubos cóncavos de oro, nanotoxicología
gold nanoparticles, osteoblasts, gold concaves nanocubes, nanotoxicology
El estudio de los nanomateriales (NMs), es de gran interés debido a sus propiedades como tamaño, naturaleza química y forma. Las nanopartículas de oro (AuNPs), en formas como esferas, rodillos, estrellas son utilizadas en diagnóstico y terapias tumorales, mientras que los cubos cóncavos, son prometedores en el diagnóstico y marcaje molecular, debido a su efecto de resonancia del plasmón de superficie localizado (LSPR); sin embargo, no existen estudios toxicológicos in vitro que permitan asegurar su biocompatibilidad. Es por ello, que se realizó la síntesis de nanocubos cóncavos de oro (AuNCCs) y la evaluación de su efecto citotóxico en osteoblastos murinos MC3T3-E1, ya que pertenecen al sistema óseo y son células que permiten la regeneración y maduración de los huesos. En este trabajo se logró sintetizar de forma sistemática 3 tamaños de nanocubos etiquetados como: Pequeños (22±4 nm), Medianos (35±4 nm) y Grandes (40±3 nm); en 3 diferentes concentraciones de AuNCCs: 0.45 mM, 2.25mM y 4.5 mM de Au0, para cada tamaño. Se evaluaron sus propiedades fisicoquímicas y se monitoreó su estabilidad coloidal, mediante espectroscopía UV-Visible, microscopia electrónica de transmisión (TEM), dispersión de luz dinámica (DLS) con mediciones de diámetro hidrodinámico y potencial zeta. Además de evaluar su toxicidad y los cambios morfológicos en osteoblastos inducidos por exposición de 48 horas a los AuNCCs, mediante ensayos como reducción de MTT, generación de ROS, hemocompatibilidad, tipo de muerte celular e internalización por citometría de flujo. Los resultados de este proyecto indican que un menor tamaño y mayor concentración de AuNCCs, inducen una mayor toxicidad al aumentar la generación de ROS y también produciendo cambios en la morfología celular. Se obtuvo la concentración inhibitoria media (IC50) de estos cubos y la cantidad adecuada en la cual estos AuNCCs no causan toxicidad en los osteoblastos ni en pruebas de hemocompatibilidad. Se encontró también que los AuNCCs producen en mayor porcentaje muerte por apoptosis temprana y estos también se internalizan en las células, siendo esto más visible en concentraciones de 2.25 mM de Au0 para los AuNCCs de todos los tamaños.
The study of nanomaterials (NMs) is of great interest due to their size, chemical nature, and shape properties. Gold nanoparticles (AuNPs), in shapes such as spheres, rods, and stars, are used in tumor diagnosis and therapy, while concave cubes are promising in molecular diagnosis and labeling due to their localized surface plasmon resonance effect (LSPR). However, to the best of our knowledge, there are no in vitro toxicological studies to confirm their biocompatibility. Therefore, in this work, the synthesis of concave gold nanocubes (AuNCCs) and the evaluation of their cytotoxicity on MC3T3-E1 murine osteoblasts were carried out. Herein, the systematic synthesis of 3 sizes of AuNCCs: Small (22±4 nm), Medium (35±4 nm), and Large (40±3 nm), with 3 different concentrations of AuNCCs at 0.45 mM, 2.25 mM, and 4.5 mM, for each of them is presented. Physicochemical characterization was carried out to monitor the stability through UV-Visible spectroscopy, transmission electron microscopy (TEM), dynamic light scattering (DLS), with measurements of hydrodynamic diameter and z potential. The morphological changes of osteoblast after 48 hours of exposition to AuNCCs indicate that cells undergo cell death. In addition, cytotoxicity, type of cell death, ROS generation, hemocompatibility, and internalization of AuNCCs were assessed. The results indicate that the smaller size of AuNCCs and higher AuNCCs concentration induce more significant toxicity by increasing ROS generation, cell death by early apoptosis, and producing changes in cell morphology. The half-maximal inhibitory concentration (IC50) of AuNCCs was obtained, as also the concentrations in which AuNCCS are biocompatible and hemocompatible. It was found that AuNCCs internalized to osteoblast at concentrations of 2.25 mM Au0 in AuNCCs.
CICESE
2022
Tesis de maestría
Español
Jiménez Martínez, W.J. 2022. Síntesis de nanopartículas de oro con morfología de cubos cóncavos y su influencia in vitro en la viabilidad y morfología de osteoblastos. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 77 pp.
PROPIEDADES DE LOS MATERIALES
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