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Identificación de péptidos antimicrobianos producidos por Bacillus con capacidad de inhibir el crecimiento de aislados clínicos de Staphylococcus aureus
Identification of antimicrobial peptides produced by Bacillus with inhibitory activity on growth Staphylococcus aureus clinical isolates
IVAN ALEXANDER SANTOS CABRERA
Jorge Olmos Soto
Acceso Abierto
Atribución
Sthapylococcus, Probióticos, Microbiota, Péptidos Antimicrobianos (AMPs) Aminoácidos (AA)
Staphylococcus, Probiotics, Microbiota, Antimicrobial Peptides (AMP), Amino Acids (AA)
Algunas especies del género Staphylococcus están asociadas a infecciones oportunistas de relevancia clínica. Las infecciones producidas por algunas especies como S. haemolyticus y S. aureus, se asocian con pacientes que sufren de un sistema inmunitario comprometido o en tratamiento con medicamentos inmunosupresores. Sin embargo, el aumento de la presencia de S. aureus resistentes a antibióticos de última generación, ha sido un tema de interés de salud pública y de preocupación mundial. La investigación de los beneficios del uso de probióticos en las enfermedades bacterianas, se ha llevado a cabo de forma intensa en los últimos años como alternativa a los tratamientos farmacológicos actuales. Las publicaciones demuestran que la aplicación de probióticos a las enfermedades bacterianas reduce las infecciones producidas por patógenos microbianos. La identificación de nuevos antibióticos es necesaria para reducir la presencia de cepas resistentes. Algunas especies de Bacillus tienen la capacidad de producir compuestos con actividad antimicrobiana principalmente de naturaleza peptídica denominados péptidos antimicrobianos (AMPs). En el presente trabajo, se evaluaron diferentes cepas Bacillus contra dos aislados clínicos provenientes de pacientes mayores de 40 años con infección urinaria, identificados como S. haemolyticus y S. aureus. La cepa B2 mostró una actividad contra ambas especies patógenas y fue seleccionada para la identificación de AMPs. La producción de péptidos antimicrobianos durante el crecimiento de la cepa B2 fue determinada mediante una curva de crecimiento, encontrándose que el punto de producción máxima se lleva a cabo en el tiempo T2 de la fase estacionaria. Las fracciones de bajo peso molecular (menor a 3 KDa) obtenidas mediante ultrafiltración mostraron termo-estabilidad a 37°C, resistencia a enzimas fisiológicas (tripsina y proteinasa K) y no fueron afectadas por las sales del medio de cultivo. Los análisis de cromatografía líquida de alta resolución de fase reversa (RP-HPLC), corroboraron la presencia de péptidos en la fracción de bajo peso molecular. La obtención de péptidos de bajo peso molecular, con ausencia de modificaciones postraduccionales y termo-resistentes, propone una alternativa al uso de antibióticos, para tratar infecciones ocasionadas por especies resistentes del género Staphylococcus.
Some species of the genus Staphylococcus are associated with oortunistic infections of clinical relevance. Infections caused by some species, such as S. haemolyticus and S. aureus, are associated with patients suffering from a compromised immune system or taking immunosuressive drugs. However, the increase in the presence of S. aureus resistant to the latest generation antibiotics has been a topic of public health interest and global concern. Investigation of the benefits of the use of probiotics in bacterial diseases has been intensively carried out in recent years as an alternative to current pharmacological treatments. The publications show that the alication of probiotics to bacterial diseases reduces infections caused by microbial pathogens. The identification of new antibiotics is necessary to reduce the presence of resistant strains. Some Bacillus species have the ability to produce compounds with antimicrobial activity, mainly peptidic, called antimicrobial peptides (AMPs). In the present work, different Bacillus strains were evaluated against two clinical isolates from patients older than 40 years with urinary tract infections, identified as S. haemolyticus and S. aureus. Strain B2 showed activity against both pathogenic species and was selected for AMP identification. The production of antimicrobial peptides during the growth of strain B2 was determined using a growth curve, finding that the point of maximum production occurs at time T2 of the stationary phase. Low molecular weight fractions (less than 3 KDa) obtained by ultrafiltration showed thermostability at 37°C, resistance to physiological enzymes (trypsin and proteinase K) and were not affected by salts in the culture medium. Reversed-phase high-performance liquid chromatography (RP-HPLC) analyses confirmed the presence of peptides in the low molecular weight fraction. Obtaining low molecular weight peptides, with the absence of post-translational and heat-resistant modifications, proposes an alternative to the use of antibiotics to treat infections caused by resistant species of the genus Staphylococcus.
CICESE
2022
Tesis de maestría
Español
Santos Cabrera, I.A. 2022. Identificación de péptidos antimicrobianos producidos por Bacillus con capacidad de inhibir el crecimiento de aislados clínicos de Staphylococcus aureus. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 59 pp.
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