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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3852| Nanopartículas virales con capacidad de inhibir la cadherina-11 y su potencial uso en el tratamiento de cáncer de mama Viral nanoparticles to block cadherin-11 and its potential use against breast cancer | |
| Martha Mariana Herrera Hernández | |
| RUBEN DARIO CADENA NAVA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Cadherina-11, Farmacóforo, SD133*, Nanoanticuerpo, Nanopartículas virales cadherin-11, pharmacophore, SD133*, nanobodies, viral nanoparticles | |
| El cáncer de mama es la principal causa de muerte por cáncer en las mujeres. La metástasis es un factor que incrementa la tasa de mortalidad, por lo cual la búsqueda de terapias para evitarla es de vital importancia. Se ha encontrado que existen proteínas que juegan un papel muy importante en los procesos de proliferación y metástasis de células cancerosas, por ejemplo, la cadherina-11 (CDH11), que se sobreexpresa en células altamente invasivas. Por lo cual, en este proyecto se propuso bloquear el ectodominio 1 (EC1) de la CDH11 para disminuir o suprimir la proliferación de células cancerosas y la metástasis. Se consideraron dos estrategias: la primera utilizando el farmacóforo hidrofóbico SD133* y, la segunda a través de nanoanticuerpos (Nb o VHH) anti-CDH11. Considerando que la molécula SD133* es muy pequeña, es necesario tener nanopartículas que la contengan para evitar que sean eliminadas rápidamente del organismo. Para llevar a cabo tal objetivo se obtuvieron nanopartículas virales (VNPs) del virus del mosaico del bromo (BMV) y virus del moteado clorótico del caupí (CCMV) funcionalizadas con la molécula SD133* y con PEG-SD133*. Las VNPs anti-CDH11 se evaluaron in vitro a través de ensayos de herida y se demostró que las partículas de BMV-PEG-SD133* retrasaron 8 y 12 h la migración de la línea celular de cáncer invasivo humano MDA-MB-231 y de ratón 4T1, respectivamente. Además, las mismas VNPs tuvieron un efecto negativo en el crecimiento de las células tumorales 4T1 en modelo murino, al reducir un 23% el volumen y un 20% el peso de los tumores. Para la obtención de Nbs anti-CDH11 se purificaron los plásmidos que contenían la secuencia codificante del dominio VHH. Se estandarizó el protocolo de expresión de Nbs utilizando el sistema pComb3XSS-TOP10F’, así como el protocolo de extracción de la proteína periplásmica y de purificación a través de cromatografía de exclusión molecular (SEC), con un rendimiento de aproximadamente 17 mg/L de cultivo inducido. Finalmente, se comprobó que el Nb anti-CDH11 purificado fue capaz de unirse al EC1-CDH11. Las dos estrategias anti-CDH11 evaluadas, arrojaron resultados prometedores por lo cual es importarte continuar con el desarrollo de éstas. Breast cancer is the main cause of cancer associated death in women. Metastasis is a factor that increases the mortality rate, thus the search for therapies to prevent it is of vital importance. It has been found that there are proteins that play a fundamental role in the processes of proliferation and metastasis of cancer cells, for example, cadherin-11 (CDH11), which is overexpressed in highly invasive cells. Therefore, in this project we proposed to block ectodomain 1 (EC1) of CDH11 to decrease or suppress cancer cell proliferation and metastasis. Two strategies were considered: the first using the hydrophobic pharmacophore SD133* and, the second through anti-CDH11 nanobodies (Nb). It’s important to note that SD133* molecule needs to be bound to a nanoparticle to prevent it from being rapidly eliminated from the body because of its small size. To achieve this objective, viral nanoparticles (VNPs) of brome mosaic virus (BMV) and cowpea chlorotic mottle virus (CCMV) functionalized with the SD133* molecule and with PEG-SD133* were obtained. The anti-CDH11 VNPs were evaluated in vitro through wound assays, and it was shown that BMV-PEG-SD133* particles delayed 8 and 12 h the migration of human invasive cancer cell line MDA-MB-231 and mouse 4T1, respectively. Furthermore, the same VNPs had a negative effect on the growth of 4T1 tumor cells in mouse model by reducing tumor volume by 23% and tumor weight by 20%. To obtain anti-CDH11 Nbs, plasmids containing the coding sequence of the VHH domain were purified. The protocol for Nbs expression using the pComb3XSS-TOP10F' system was standardized, as well as the protocol for periplasmic protein extraction and purification through molecular exclusion chromatography (SEC), with a yield of approximately 17 mg/L of induced culture. Finally, the purified anti-CDH11 Nb was found to be able to bind EC1-CDH11. Both anti-CDH11 strategies evaluated showed promising results, therefore it is important to continue their development. | |
| CICESE | |
| 2023 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Herrera Hernández, M.M. 2023. Nanopartículas virales con capacidad de inhibir la cadherina-11 y su potencial uso en el tratamiento de cáncer de mama. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 84 pp. | |
| PROPIEDADES DE LOS MATERIALES | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Nanociencias |
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| tesis_Martha Mariana Herrera Hernández_24 feb 2023.pdf | Versión completa de la tesis | 8.08 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |