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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3929| Papel del citoesqueleto de actina en la organización celular del hongo entomopatógeno Metarhizium brunneum Role of the actin cytoskeleton in the cellular organization of the entomopathogenic fungus Metarhizium brunneum | |
| Abraham Asahel Gasca Venegas | |
| OLGA ALICIA CALLEJAS NEGRETE Rosa Reyna Mouriño Pérez | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Entomopatógenos, citoesqueleto, F-actina, polimerización, Lifeact, Latrunculina B. Entomopathogens, cytoskeleton, F-actin, Lifeact, polymerization, Latrunculin B. | |
| El crecimiento polarizado es esencial para el desarrollo de los organismos y puede apreciarse en las raíces de las plantas, en la extensión de las neuronas y hasta en las hifas de los hongos filamentosos. En este tipo de crecimiento participan diferentes complejos proteicos, siendo uno ellos el citoesqueleto, compuesto por microtúbulos, filamentos intermedios y microfilamentos de actina. La dinámica de los componentes del citoesqueleto ha sido ampliamente estudiada en hongos como Neurospora crassa, Aspergillus nidulans, Trichoderma atroviride, entre otros, describiéndose por ejemplo la participación de los microfilamentos de actina en el transporte y posicionamiento de elementos cargo (peroxisomas, mitocondrias, vesículas, etc.,) a las zonas de crecimiento más activo, así como en la formación de septos, en la respuesta inmunológica, endocitosis y exocitosis y en procesos reproductivos. Sin embargo, en hongos entomopatógenos como Metarhizium, poco se sabe sobre la dinámica del citoesqueleto de actina durante su desarrollo y transporte intracelular. En este trabajo se llevó a cabo la construcción de un vector para el marcaje fluorescente de la actina en M. brunneum mediante el reportero Lifeact-GFP. Los resultados mostraron la presencia de parches de actina distribuidos en las hifas en crecimiento. También se probó el efecto de la alteración del citoesqueleto de actina, utilizando Latrunculina B (Lat B), determinando su concentración mínima inhibitoria de 1.5 µg/mL, la cual provoca alteraciones en las hifas como ramificaciones apicales y aumento del 23 % en el grosor. Además, la dinámica de los peroxisomas y cuerpos lipídicos se vio afectada en presencia de Lat B, con disminución en su velocidad de desplazamiento del 11% y 28% respectivamente, al igual que alteraciones en la estructura de la pared celular con engrosamientos irregulares y presencia de parches de quitina, así como una disminución en la tasa de endocitosis y un incremento en la sensibilidad al colorante Rojo Congo (RC). Toda esta información ayuda en la comprensión del papel del citoesqueleto de actina y los mecanismos de distribución intracelular de M. brunneum en su fisiología. Polarized growth is essential for the development of organisms, and it can be seen in the roots of plants, in the extension of neurons, and even on hyphae of filamentous fungi. Different protein complexes participate in this type of growth, one of them being the cytoskeleton, made up of microtubules, intermediate filaments, and actin microfilaments. The dynamics of the cytoskeleton components has been widely studied in fungi such as Neurospora crassa, Aspergillus nidulans, Trichoderma atroviride, among others, describing, for example, the participation of actin microfilaments in the transport and positioning of cargo elements (peroxisomes, mitochondria, vesicles, etc.,) to the most active growth zones, as well as in the formation of septa, in the immunological response, endocytosis and exocytosis and in reproductive processes. However, in entomopathogenic fungi such as Metarhizium, little is known about the dynamics of the actin cytoskeleton during its development and its relationship with intracellular elements and its transport. In this work, the construction of a vector for the fluorescent labeling of actin in M. brunneum using the Lifeact-GFP reporter was carried out. The results showed the presence of actin patches distributed in the growing hyphae. The effect of the alteration of the actin cytoskeleton was also tested, using the Latrunculin B (Lat B), determining its minimum inhibitory concentration of 1.5 µg/ml, which causes alterations in the hyphae such apical ramifications and an increase in thickness up to 23%. In addition, the dynamics of peroxisomes and lipid bodies were affected in the presence of Lat B, with a decrease in their displacement speed of 11% and 28% respectively, as well as alterations in the structure of the cell wall with irregular thickening and presence of chitin patches, as well as a decrease in the endocytosis rate and an increase in the sensitivity to Congo Red (RC) dye. All this information helps in understanding the role of the actin cytoskeleton and the intracellular distribution mechanisms of M. brunneum in its physiology. | |
| CICESE | |
| 2023 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Gasca Venegas, A.A. 2023. Papel del citoesqueleto de actina en la organización celular del hongo entomopatógeno Metarhizium brunneum. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 60 pp. | |
| PROCESOS MICROBIANOS | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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