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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/4107| Análisis de LST-1 en la formación de vesículas COPII dependientes de ERV-14 en Neurospora crassa Role of LST-1 during formation of ERV-14 dependent COPII vesicles in Neurospora crassa | |
| Monica Esther Cante Paz | |
| MERITXELL RIQUELME PEREZ | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Neurospora crassa, vesículas COPII, tráfico vesicular, LST-1, ERV-14 Neurospora crassa, vesicle trafficking, COPII vesicles, LST-1, ERV-14 | |
| El crecimiento de hongos filamentos requiere la síntesis continua de proteínas de la pared celular y membrana plasmática (MP). Este proceso tiene lugar en el retículo endoplasmático (RE), donde las proteínas recién sintetizadas se incorporan a vesículas cubiertas con proteínas de revestimiento II (COPII). Estas vesículas emergen de la membrana del RE y siguen la ruta secretora hacia su destino final. En Neurospora crassa se ha identificado a ERV-14 como un receptor de carga esencial del RE. En Saccharomyces cerevisiae Erv14p funciona como receptor de carga para algunas proteínas de MP, uniéndose simultáneamente a la proteína de carga y a Sec24p, una proteína de la capa interna de COPII. Análisis anteriores mediante microscopía confocal de barrido láser en hifas de N. crassa han mostrado co-localización parcial de ERV-14 y SEC-24 etiquetadas con proteínas fluorescentes dentro de una red membranosa. En S. cerevisiae Lst1p sustituye a Sec24p en la capa interna de vesículas COPII que exportan como cargas a determinadas proteínas de MP. Sin embargo, aún se desconoce si Lst1p interactúa con receptores de cargas de la familia de Erv14p. En este trabajo, se analizó la distribución y dinámica de LST-1, ortóloga de Lst1p, en hifas en crecimiento de N. crassa, mediante microscopía confocal de barrido láser y microscopía confocal de disco giratorio. Se observó a LST-1-GFP distribuida a lo largo de la célula, aunque más predominantemente en regiones subapicales y distales, en forma de puntos cerca de los núcleos. Se observaron puntos fluorescentes moviéndose a regiones corticales distales, sugiriendo que LST-1-GFP podría participar en una subpoblación de vesículas COPII que viajan directamente a la MP. Las co-expresiones de LST-1-GFP y ERV-14-mCherry mostraron ausencia de co-localización, sugiriendo que LST-1 puede estar interactuando con otros receptores de carga, pero no con ERV-14. Por otro lado, en las co-expresiones de LST-1-GFP y SEC-24-mCherry se observó un patrón de distribución diferente de ambas proteínas. LST-1 se encontró principalmente en regiones distales, mientras que SEC-24 se encontró cerca del ápice. Sin embargo, se encontró co-localización parcial en regiones cercanas al ápice, sugiriendo que ambas proteínas convergen transitoriamente en el mismo organelo. The growth of filamentous fungi requires continuous synthesis of proteins for the cell wall and plasma membrane (PM). This process takes place in the endoplasmic reticulum (ER), where newly synthesized proteins are incorporated into vesicles coated with COPII proteins. These vesicles emerge from the ER membrane and follow the secretory pathway to their final destination. In Neurospora crassa, ERV-14 has been identified as an essential cargo receptor of the ER. In Saccharomyces cerevisiae, Erv14p functions as a cargo receptor for some PM proteins, simultaneously binding to the cargo protein and to Sec24p, an inner coat protein of COPII. Previous analyses using laser scanning confocal microscopy in N. crassa hyphae have shown partial co-localization of ERV-14 and SEC-24 labeled with fluorescent proteins within a membranous network. In S. cerevisiae, Lst1p replaces Sec24p in the inner layer of COPII vesicles that export certain PM proteins as cargo. However, it is still unknown whether Lst1p interacts with cargo receptors of the Erv14p family. In this work, the distribution, and dynamics of LST-1, the ortholog of Lst1p, in growing N. crassa hyphae were analyzed using laser scanning confocal microscopy and spinning disk confocal microscopy. LST-1-GFP was observed distributed along the cell, although more predominantly in subapical and distal regions, appearing as dots near the nuclei. Fluorescent dots were observed moving to distal cortical regions, suggesting that LST-1-GFP could participate in a subpopulation of COPII vesicles that travel directly to the PM. Co-expression of LST-1-GFP and ERV-14-mCherry showed an absence of co-localization, suggesting that LST-1 may be interacting with other cargo receptors, but not with ERV-14. On the other hand, co-expression of LST-1-GFP and SEC-24-mCherry, a different distribution pattern of both proteins was observed. LST-1 was mainly found in distal regions, while SEC-24 was found near the apex. However, partial co-localization was found in regions close to the apex, suggesting that both proteins transiently converge in the same organelle. | |
| CICESE | |
| 2024 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Cante Paz, M.E. 2024. Análisis de LST-1 en la formación de vesículas COPII dependientes de ERV-14 en Neurospora crassa. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 54 pp. | |
| PROTEÍNAS | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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| tesis_Monica Esther Cante Paz_11 abril 2024.pdf | Descripción final de la tesis | 4.13 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |