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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/4279| Expresión recombinante de la proteína de cápside del virus de moteado clorótico del caupí Expression of recombinant cowpea chlorotic mottle virus capsid protein | |
| Oscar Uriel Patricio Hernández | |
| RUBEN DARIO CADENA NAVA | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Biorreactor, VLPs, CCMV, proteína de cápside, E. coli Bioreactor, VLPs, CCMV, capsid protein, E. coli | |
| Las VPLs de CCMV se han convertido en un sistema prometedor como nanoacarreador de moléculas de interés biomédico, sin embargo, su producción requiere de una gran cantidad de hojas infectadas para obtener la partícula viral suficiente que permita llevar a cabo la investigación. Se ha optado por su producción en un sistema heterólogo con la finalidad de obtener la proteína de cápside del CCMV soluble y sin etiquetas, para su óptima y fácil aplicación. En este estudio, se logró producir la proteína de cápside del CCMV de forma soluble en Escherichia coli BL21 (DE3) y se purificó en forma de VLPs. La producción se llevó a cabo en matraces con medio LB y MMM que presentaron una producción de 14.03 2.80 y 5.53 0.59 mg/L, respectivamente. La producción en biorreactores con MMM fue de 103.07 32.35mg/L, lo anterior resalta las ventajas de realizar el crecimiento en biorreactores. Las VPLs obtenidas tienen una morfología esférica con un tamaño aproximado de 28 nm. La proteína de cápside del CCMV soluble y sin etiquetas mostró su funcionalidad al ser recuperada en forma de VLPs. Esto demuestra que su producción en bacterias es conveniente y eficiente al disminuir los tiempos, en comparación con la producción del virus en plantas. CCMV VLPs have become a promising system as nanocarriers of molecules of biomedical interest, however, their production requires a large number of infected leaves to obtain enough virus to carry out the research. Therefore, their production in a heterologous system has been chosen to obtain soluble and label-free CCMV capsid protein, for its optimal and easy application. In this study, soluble CCMV capsid protein was produced in Escherichia coli BL21 (DE3) and purified in the form of VLPs. Production was carried out in flasks with LB and MMM medium that produced 14.03 ± 2.80 and 5.53 ± 0.59 mg/L, respectively. Production in bioreactors with MMM was 103.07 ± 32.35 mg/L, highlighting the advantages of carrying outgrowth in bioreactors. The obtained VLPs have a spherical morphology with an approximate size of 28 nm. The soluble and label-free CCMV capsid protein showed its functionality when recovered in the form of VLPs. This demonstrates that its production in bacteria is convenient and efficient by reducing the time, compared to the production of the virus in plants and even purification of the capsid protein. | |
| CICESE | |
| 2025 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Patricio Hernández, O.U. 2025. Expresión recombinante de la proteína de cápside del virus de moteado clorótico del caupí. Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. 31 pp. | |
| PROPIEDADES DE LOS MATERIALES | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Nanociencias |
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| Fichero | Descripción | Tamaño | Formato | |
|---|---|---|---|---|
| tesis_Oscar Uriel Patricio Hernández_2025.pdf | Descripción completa de la tesis | 2.18 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |