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Localización y dinámica del componente del polarisoma BUD-6 en el hongo filamentoso Neurospora crassa
Localization and dynamics of the polarisome component BUD-6 in the filamentous fungus Neurospora crassa
Mario Enrique Yáñez Gutiérrez
Ernestina Castro Longoria
Acceso Abierto
Atribución
Neurospora crassa,BUD-6, GFP, FM4-64, Spk,Hongo filamentoso,Anastomosis
El crecimiento polarizado es un proceso central en el funcionamiento y la morfogénesis demuchos tipos celulares de los eucariotas. Un organismo modelo para el estudio delcrecimiento polarizado, es la levadura de gemación Saccharomyces cerevisiae, ya que enalgunas etapas de su ciclo de vida presenta el proceso de polaridad celular. Uno de loscomplejos proteicos implicados en el mantenimiento de la polaridad celular es elpolarisoma, que ha sido caracterizado en S. cerevisiae y que está constituido por lasproteínas Spa2p, Pea2p, Bud6p, Aip3p, Bni1p y posiblemente Msb3p y Msb4p. En hongosfilamentosos son pocos los estudios acerca de los componentes del polarisoma, por lo queel objetivo de este estudio fue investigar la dinámica y localización de la proteína BUD-6en el hongo filamentoso Neurospora crassa para elucidar el posible papel que desempeñaen la morfogénesis celular. Mediante microscopía confocal se analizó la localización ydinámica de BUD-6 etiquetada con la proteína verde fluorescente (por sus siglas en InglésGFP). Se determinó que en hifas maduras la proteína BUD-6 se localiza en forma de ungradiente apical concentrándose alrededor del Spitzenkörper (Spk) y disminuyendo suconcentración hacia el subápice de las hifas. Se pudo determinar que participa activamenteen la formación de septos en germínulas e hifas maduras así como en los septos de losconidióforos. Otro de los procesos en el que se pudo determinar la participación de BUD-6,fue en la fusión de células o anastomosis. BUD-6 se concentró en la zona apical de las hifasantes de que hicieran contacto. BUD-6 después de acumuló en el sitio de fusión ysubsecuentemente formó un anillo en cuyo centro se llevó a cabo la perforación para elintercambio de citoplasma. La cepa ∆bud-6 mostró una drástica reducción en la tasa decrecimiento, y se caracterizó por la carencia de septos y fusiones celulares y la producciónde conidióforos anormales. Cabe señalar que en la cepa ∆bud-6 las hifas mantuvieron uncrecimiento polarizado aunque la típica morfología hifoide se observó evidentementealterada y sin la presencia del Spk. Por lo tanto se concluye que en N. crassa la proteínaBUD-6 no es esencial para el mantenimiento de la polaridad celular pero juega un papelclave en la integridad del Spk, la formación de septos, el desarrollo normal de losconidióforos, en el proceso de anastomosis y consecuentemente en el desarrollo normal deuna colonia. 
Polarized growth is a central process on the morphogenesis of many cellular types ofeukaryotic organisms. A model organism for the study of polarized growth is the yeastSaccharomyces cerevisiae, since at some stages of its life cycle it presents the process ofcellular polarity. One of the protein complexes involved in the maintenance of cellularpolarity is the polarisome, which has been characterized in S. cerevisiae and whosecomponents are the proteins Spa2p, Pea2p, Bud6p, Aip3p, Bni1p and possibly Msb3p andMsb4p. In filamentous fungi there are few studies about the components of this complex.Therefore the aim of this study was to investigate the dynamics and localization of theprotein BUD-6 in the filamentous fungus Neurospora crassa to elucidate its possible role incellular morphogenesis. Confocal microscopy was used to analyze the localization anddynamics of BUD-6 labeled with the green fluorescent protein (GFP). It was determinedthat in mature hyphae the protein BUD-6 is located in the cellular apex as an apical gradientsurrounding the Spitzenkörper (Spk) and its concentration decrease towards the sub-apex ofhyphae. It was possible to determine that BUD-6 actively participates in the formation ofsepta in germlings and mature hyphae as well as in septa of conidiophores. Anotherprocess, in which it was possible to determine the participation of BUD-6, was in thecellular fusion or anastomosis. BUD-6 appeared in the apical zone of the fusing hyphaebefore they made contact. Afterwards BUD-6 was accumulated in the site of fusionsubsequently forming a ring in whose center the perforation for the exchange of cytoplasmwas formed. The ∆bud-6 strain showed a drastic reduction in growth rate and wascharacterized by the lack of septa and cellular fusions as well as the production of abnormalconidiophores. It must be mentioned that in the ∆bud-6 strain, hyphae were seen tomaintain polarized growth, however the typical hyphoid morphology was observedevidently altered and without the presence of a Spk. Therefore it can be concluded that inN. crassa the protein BUD-6 is not essential for the maintenance of cellular polarity butplays a key role in the Spk integrity, septum formation, the anastomosis process, normaldevelopment of conidiophores and consequently normal colony development.
CICESE
2010
Tesis de maestría
Español
Yáñez Gutiérrez, M.E..2010.Localización y dinámica del componente del polarisoma BUD-6 en el hongo filamentoso Neurospora crassa.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.
MICROBIOLOGÍA
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