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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/495| Microfluidic device for the study of adhesion in living cells by microscopy Dispositivo microfluídico para el estudio de adhesión de células vivas por microscopía | |
| Jhonnatan Guerrero Muñoz | |
| Víctor Ruiz Cortés Cyrille Vezy | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Microfluídica,Microscopía,Biofotónica,Sistema de microscopía de constraste de interferencia por reflexión,RICM,Reflection interference contrast microscopy system,Biophotonics,Microfluidics,Microscopy | |
| Esta tesis muestra un estudio teórico y experimental de diferentes áreas como la microfluídica, la óptica y la biología para acoplar en un solo dispositivo para una aplicación biofotónica. Un generador de gradientes de 2 entradas se realiza mediante fotolitografía utilizando una deposición de fotoresina SU-8 2050 por centrifugado para el dispositivo maestro. El dispositivo de microfluídos se realizó con polidimetilsiloxano (PDMS) y se unió a un cubreobjetos de vidrio por grabado por reacción de iones (RIE). El dispositivo de microfluídos fue adaptado para formar parte de un sistema de microscopia de contraste de interferencia por reflexión (RICM). Los resultados muestran que el paso de revelado es un paso crítico para asegurar buenos dispositivos microfluídicos. El generador de gradientes se caracteriza por intensidad. Primero, fluyendo una sustancia de color (permanganato de potasio) en una entrada y de agua en el otro a una velocidad de 0.4ml/minute. La toma de imágenes fue realizada con un microscopio convencional. Después se realizó otro experimento en el cual se hizo fluir partículas fluorescentes (Alexa488) en una entrada y agua en la otra. La toma de imágenes fue realizada en un sistema de microscopia de fluorescencia, obteniendo en ambos casos un gradiente bien definido. Un sistema de RICM fue construido principalmente usando un microscopio Zeiss, un fotodiodo como una fuente con una longitud de onda de λ = 658nm y un difusor. Esta técnica se utilizó para medir el radio de curvatura de partículas esféricas de una manera muy precisa y después se utilizó esta información para encontrar la distancia de la partícula a la superficie, se obtuvo una distancia de separación de 0,389 æm para partículas esféricas de R = 10.018æm. También se hizo el cultivo de células MDA MB 231 mediante el proceso convencional para cultivo celular y tratamos de fijar las células en un entorno microfluídico encontrando problemas de burbújas y de presión cuando fluye medio de cultivo fresco. This thesis shows the study theoretical and experimental of different areas such as microfluidics, optics and biology in order to couple them into a single device for biophotonics application. A gradient generator of 2 inlets is made by photolithography using a deposition of SU-8 2050 photoresist by spincoat for the master device. The microfluidic device was made with Polydimethylsiloxane (PDMS) and was bonded to a glass coverslip by Reactive-Ion Etching (RIE). The microfluidic device was adapted to form part of a reflection interference contrast microscopy system (RICM). The results shows that developing is a critical step to ensure good microfluidic devices. The gradient generator was characterized by intensity. First, flowing a colored subs- tance (potassium permanganate) in one inlet and water in the other at 0.4ml/minute and taking pictures on a conventional microscope. After flowing fluorescent probes (Ale- xa488) and water and taking pictures at a fluorescent microscope system obtaining in both cases a very well defined gradient. A RICM system was build maninly using a ZEISS microscope, a photodiode as a source with a wavelength of λ = 658nm and a diffuser. This technique was used to measure the radius of curvature of spherical beads very accurately and after, using this information to find the distance from the particle to the surface obtaining a separation distance of 0.389æm for spherical beads of R = 10.018æm. We also did cell culture of MDA MB 231 under conventional process for cell culture and tried to set the cells under microfluidic environment getting some bubbles and pressure problems when flowing fresh medium. | |
| CICESE | |
| 2014 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Guerrero Muñoz, J.2014.Microfluidic device for the study of adhesion in living cells by microscopy.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.59 pp. | |
| ÓPTICA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Óptica |
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|---|---|---|---|---|
| 235701.pdf | Versión completa de la tesis | 5.44 MB | Adobe PDF | Visualizar/Abrir |