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Comparación de dos métodos moleculares para la identificación rápida de especies del género Candida en muestras vaginales
Comparision of two molecular methods for the rapid identification of Candida species from viginal isolates      
Rosa Angelina López Carrasco
Rosa Reyna Mouriño Pérez
Acceso Abierto
Atribución
Candida,Candidiasis vaginal,APCR múltiple,Infecciones vaginales
La candidiasis vulvovaginal es una infección común, que afecta a una granproporción de mujeres, causada por especies oportunistas de Candida,típicamente Candida albicans. En las últimas dos décadas, se ha observado uncambio en las especies de Candida. Con la introducción de azoles de segundageneración, el porcentaje de estas especies aumento al 40-60% de las reportadasen casos de enfermedad masiva. La posibilidad de tener diferentes especies deCandida responsables de las infecciones y que además tienen respuestasdiferentes al tratamiento con antimicóticos, ha promovido que desde los 90’s, sehayan desarrollado varios métodos moleculares de diagnóstico, que detectansecuencias genómicas especie-específicas de Candida spp En este trabajo seestandarizó un método de PCR múltiple para la identificación de especies delgénero Candida en aislamientos procedentes de pacientes ginecológicas de laCiudad de Ensenada. Para este PCR múltiple se probaron y diseñaronoligonucleótidos generales y específicos para diferenciar las cuatro especies másfrecuentes de Candida en infecciones vaginales. Se realizaron distintos tipos depruebas con la mezcla de oligonucleótidos para estandarizar el método de PCR.Después de completadas las pruebas se utilizó para identificar especies deCandida provenientes de pacientes ginecológicas. Este método identifico que 66%corresponden a C. albicans, 26.4% a C. glabrata y 7.5% a C. parapsilosis.Comparando este método con el PCR-RFLP se obtuvo una coincidencia en eldiagnóstico de especie en el 92.4% de los casos. El método de PCR múltipleproporcionó resultados en un tiempo menor (5 horas) que el PCR-RFLP (9 horas).Además el costo del PCR múltiple es menor. 
Vulvovaginal candidiasis is a common infection, which affects a largeproportion of healthy women, caused by opportunistic species of Candida, typicallyCandida albicans. In the past two decades, there has been a change in theCandida species causing invasive disease. With the introduction of secondgenerationazole, the percentage of this species increased to 40-60% of reportedcases of massive disease. The possibility of different species of Candidaresponsible for infection and also have different responses to treatment withantifungal, has promoted since the 90's, the developed several moleculardiagnostic methods that detect genomic sequences species-specific Candida sppin order to obtain a diagnosis feasible, fast and secure. The PCR-based methodsshow a clearer sensitivity on identification that in cultures. In this work westandardized a PCR multiplex method for identification of Candida species isolatesfrom gynecological patients in Ensenada. For this method, general and specificprimer sets for Candida were designed and tested. This method identified that 66%belong to C. albicans, 26.4% to C. glabrata, and 7.5% to C. parapsilosis. Thecomparison of PCR multiplex and PCR-RFLP showed a coincidence of 92.4% inthe species identified, nevertheless the PCR multiplex gave the result faster and ata lower cost. We conclude that the method evaluated is a feasible, reliable andquick identification method of Candida at level species. 
CICESE
2010
Tesis de maestría
Español
López Carrasco, R.A.2010.Comparación de dos métodos moleculares para la identificación rápida de especies del género Candida en muestras vaginales.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California.
HONGOS
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