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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/601| Expresión genética en familias de Penaeus vannamei expuestas experimentalmente al virus de la mancha blanca (WSSV) Gene expression on Penaeus vannamei families exposed experimentally to white spot syndrome virus (WSSV) | |
| David Osvaldo Martínez Corona | |
| Ana Denise Re Araujo Ivone Giffard Mena | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Osmoregulación,Programa de selección genética,Sistema inmune,Q-PCR,ATPasa Na+/K+,Crustinas,Peneidinas,Ciencias del mar | |
| El virus de la mancha blanca o White Spot Syndrome Virus (WSSV, por sus siglas en inglés) es un patógeno letal que afecta el cultivo de camarón a nivel mundial. Los síntomas visibles de los animales infectados son letargia, pérdida del apetito, expansión de cromatóforos y nado errático, pero se ha observado también una pérdida de la capacidad osmorreguladora y la presencia de inclusiones blancas de 0.2 a 0.5 mm (depósitos de calcio) al interior de la cutícula en las etapas tardías de la infección. Las medidas para contrarrestar la infección se han enfocado en mejorar los sistemas de bioseguridad, otra opción es el desarrollar camarones resistentes a patógenos específicos (SPR, por sus siglas en inglés) mediante programas de selección genética. En México se han desarrollado programas de selección genética desde hace algunos años enfocados a mejorar el crecimiento, y los organismos provenientes de familias seleccionadas son distribuidos por todo el país, sin embrago se desconoce si estas poblaciones presentan mayor ó menor susceptibilidad a patógenos, especialmente al WSSV. En el presente trabajo se evaluó mediante PCR en tiempo real la respuesta de tres familias de camarones provenientes de un programa de selección genética y un lote domesticado ante una infección experimental con el WSSV. Se cuantificó la expresión de genes implicados en el sistema inmune (crustinas y peneidinas), la osmorregulación (ATPasa Na+/K+) y el gen viral VP664, para detectar respuestas diferenciales entre familias y examinar la relación del mecanismo de osmorregulación con el proceso de infección viral. Los camarones de las tres familias seleccionadas presentaron mayor sobrevivencia que el lote domesticado al desafiarlos experimentalmente con el WSSV. Los camarones infectados con el WSSV alcanzaron un 100 % de mortalidad entre las 75 y 85 hpi. Aunque no fue posible determinar la sobrevivencia en condiciones naturales debido a que en esta tesis se infectó mediante inyección vía intramuscular este método permitió diferenciar la susceptibilidad entre familias. Los niveles de transcritos de ATPasa Na+/K+ no se vieron afectados por el WSSV, el cual incrementa el número de copias de su proteína estructural VP664 de manera exponencial entre las 6 y 24 hpi. La expresión de las crustinas y penaeidinas se presentaron de manera fluctuante entre familias y tratamientos siendo suprimida su expresión en organismos domesticados y seleccionados infectados. La crustina presentó una correlación positiva con mayor tiempo de sobrevivencia post inyección en solo una de las tres familias (rosa), lo cual hace un posible candidato como marcador inmunológico. The white spot syndrome virus (WSSV) is a lethal pathogen in the shrimp farming industry worldwide. Visible symptoms of infected animals are lethargy, food consumption loss, chromatophores expansion and erratic swimming behavior. It also has been observed that they lose osmoregulation capacity. Infected shrimp usually show white spot inclusions of 0.5 – 2.0 mm in diameter (calcium deposits) on the inside cuticle during the last stages of the infection. Countermeasures have focused on the improvement of biosecurity protocols in order to prevent the infection. Another option is the development of specific pathogen resistant shrimps (SPR) through genetic selection programs. Even when, some genetic selection programs had been developed in Mexico during the last years they mainly focused on growing improvement. Organisms originated from these programs are widely distributed along the country, but It is unknown if these populations are more or less susceptible to pathogens, particularly to WSSV. The present work has the purpose to evaluate, through Real Time PCR, the response of descendant shrimps from a genetic selection program and a domesticated lot both infected experimentally with WSSV. We quantified two genes involved in the immune system response (crustins and penaeidins), one involved in osmoregulation process (ATPase Na+/K+) and the viral gene VP664 to detect differential responses between families and examine the relation within osmoregulation mechanism and the viral infection process. Three selected families had higher survival than the domesticated lot challenged experimentally with WSSV. Infected shrimps reach 100% mortality between 75 and 85 hpi. Although is not possible to determine survival under natural conditions because virus was inoculated by injection, this method allowed us to differentiate the susceptibility between families. ATPase Na+/K+ transcripts levels was not affected by WSSV infection, copy number of viral structural protein VP664 increases exponentially between 6 and 24 hpi. Expression levels of crustins and penaeidins fluctuates between families and treatments with suppressed expression on selected and domesticated infected organisms. Crustin presented a positive co-relation with major post-injection survival time in only one of three families (pink), which makes it a possible immunological marker to measure the susceptibility to WSSV. | |
| CICESE | |
| 2011 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Martínez Corona, D.O.2011.Expresión genética en familias de Penaeus vannamei expuestas experimentalmente al virus de la mancha blanca (WSSV).Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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