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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/650| Localización y papel de la agmatinasa en el crecimiento celular del hongo Neurospora crassa Localization and role of agmatinase in the cell growth of Neurospora crassa | |
| Luis Leobardo Pérez Mozqueda | |
| Ernestina Castro Longoria | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Agmatinasa | |
| Estudios en Neurospora crassa han revelado diversos procesos celulares y moleculares que regulan el crecimiento y desarrollo en hongos filamentosos. Sin embargo, moléculas como las poliaminas no se han estudiado a fondo para elucidar su papel en la morfogénesis celular de estos organismos. Trabajos desde bacterias hasta mamíferos han implicado a la putrescina, espermidina y espermina en el proceso de desarrollo y crecimiento celular. Las poliaminas pueden ser sintetizadas mediante dos rutas metabólicas, en la primera ruta, la síntesis se lleva a cabo mediante la ornitina descarboxilasa que produce putrescina a partir de ornitina, mientras que en la segunda, la agmatinasa produce putrescina a partir de agmatina. En hongos filamentosos sólo la ruta catalizada por ornitina descarboxilasa ha sido descrita. Sin embargo, en el genoma de N. crassa se ha reportado una secuencia nucleotídica que codifica para una agmatinasa hipotética. Por lo tanto, el objetivo de este trabajo es investigar el papel de dicha proteína en el crecimiento celular de N. crassa. Para ello se generó y analizó una mutante ∆ags-1het y los resultados revelaron que la ausencia de este gen es letal para el hongo, mientras que la deficiencia produce un fenotipo aberrante. Además, se analizó la localización y dinámica de la AGS-1::GFP en N. crassa, con lo cual se observó que la agmatinasa aparentemente mantiene una relación estrecha con el citoesqueleto de actina, también se analizó la localización y dinámica de la F-actina, CDC-42 y RAC (proteínas implicadas en la organización del citoesqueleto de actina) en la mutante ∆ags-1het. No se detectó fluorescencia en las poblaciones de F-actina localizadas en la región del septo y del anillo endocítico, mientras que hubo una acumulación de fluorescencia en la población de F-actina presente en el ápice de la hifa. La localización de CDC-42 también se ve afectada, pero no la localización de RAC. Estos resultados son preliminares, pero el gen ags-1 es claramente esencial para la sobrevivencia de N. crassa. También, los resultados sugieren una posible relación, quizá de forma indirecta, entre la AGS-1::GFP con el citoesqueleto de actina. Studies in Neurospora crassa have revealed several molecular and cellular processes involved in growth and development of filamentous fungi. However, molecules such as the polyamines have not been studied thoroughly to elucidate their role in the cell growth of these organisms. Reports from bacteria to mammals have implicated the polyamines (putrescine, spermidine and spermine) in cell growth and development. Polyamines are produced by two biosynthetic pathways: in the first pathway, putrescine is produced from ornithine by ornithine decarboxilase, whereas, in the second pathway putrescine is produced from agmatine by agmatinase. In filamentous fungi only the pathway catalyzed by the ornithine decarboxylase has been described. However, in the genome of N. crassa, a nucleotide sequence has been reported to encode a hypothetical agmatinase. Therefore, the aim of this study is to investigate the role of this protein in the cellular growth of N. crassa. For that we generated and analyzed a mutant strain ∆ags-1 het and the results revealed that the lack of this gene is lethal for the fungus and its deficiency provoke an aberrant phenotype. Also, the localization and dynamics of AGS-1::GFP in N. crassa were analyzed. It was observed a possible relationship among agmatinase and the actin cytoskeleton. Also, the localization and dynamics of F-actin, CDC-42 and RAC (proteins implicated in the organization of the acting cytoskeleton) were analyzed in the mutant strain ∆ags-1 het. It was observed that the localization of F-actin in the mutant strain were modified compared with the F-actin in the wild type strain. The population of F-actin in the sub-apical region and in septa was not detected whereas in the apical region of the hypha a high concentration was observed. The localization of CDC-42 was also affected, but not the localization of RAC. These results are preliminary, but this gene is clearly essential for the survival of N. crassa. Also, the results suggest a possible relationship among the actin cytoskeleton and AGS-1::GFP. | |
| CICESE | |
| 2015 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Pérez Mozqueda, L.L.2015.Localización y papel de la agmatinasa en el crecimiento celular del hongo Neurospora crassa.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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