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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/654| Estabilización de cápsides virales para su potencial uso como bionanorreactores Viral capsids stabilization for its potential use as bionanoreactors | |
| Olga Elena Valdés Reséndiz | |
| Rubén Darío Cadena Nava | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Virus | |
| Los virus presentan ciertas características que pueden ser aprovechadas para su uso como nano-contenedores. Así, los virus de principal interés para ser utilizados de esta manera son aquellos que infectan bacterias (Bacteriófagos) y los virus de plantas como el virus del moteado clorótico del caupí (CCMV). Y dado que su potencial utilización siempre va enfocada al tratamiento de enfermedades en humanos, en donde las condiciones fisiológicas pueden no ser permisibles para el virus nativo, promoviendo su desensamble y por lo tanto desprotección de su contenido, en el presente trabajo se realizó la estabilización de cápsides y partículas tipo virus (VLP) mediante el entrecruzado de las proteínas para su eficiente uso como bionanorreactores. En este proyecto como modelo de estudio se llevó a cabo el entrecruzado de las proteínas que forman las cápside y partículas tipo virus (VLPs) del CCMV. El entrecruzado se realizó mediante glutaraldehído (GA) bajo diferentes condiciones, el cual es utilizado comúnmente para el acoplamiento de aminoácidos y en la síntesis artificial de proteínas. Posteriormente se estudió la estabilidad de las cápsides entrecruzadas a diferentes condiciones fisicoquímicas como pH, fuerza iónica y temperatura, confirmando la integridad de las mismas mediante ensayos de retardo de movilidad electroforética (EMSA), microscopia electrónica de transmisión (TEM). De los ensayos realizados se determinó que 50 mM es la concentración adecuada de glutaraldehído para la estabilización de las cápsides virales. Estos resultados podrían extenderse a otros tipos de virus y VLPs para su potencial uso como bionanorreactores. The viruses exhibit several properties that can be useful for their application as nanocontainers. For this purposes, the most interesting viruses are those that infect bacteria (bacteriophages) and those infecting plants, like the Cowpea Chlorotic Mottle Virus (CCMV). Their potential use has been mainly focused in the treatment of human diseases in, where the physiologic conditions may not be adequate for the native virus, inducing their disassembly, and then leaving its cargo unprotected. In the present work we studied the stabilization of viral capsids or virus-like particles (VLPs) by means of cross-linking of the capsid proteins, to improve their efficient use as bionanoreactors. In this work, CCMV derived VLPs were cross-linked with different glutaraldehyde (GA) concentrations and under different reaction conditions. Glutaraldehído is commonly used as a protein linker and for the artificial synthesis of proteins. The stability of the cross-linked capsids was studied under different physicochemical conditions as pH, ionic strength and temperature. The integrity of these capsids was confirmed by means of electrophoretic mobility assay (EMSA) and transmission electron microscopy (TEM). Our results showed that a treatment with 50 mM of glutaraldehyde seems to be the best for the virus capsid stabilization. These stabilization strategy could be applied to other viruses for their potential use as bionanoreactors. | |
| CICESE | |
| 2015 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| Valdés Reséndiz, O. E..2015.Estabilización de cápsides virales para su potencial uso como bionanorreactores.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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