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http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/628| Evaluación transcriptómica de la respuesta a la exposición a TCMáx en Litopenaeus vannamei ablacionados y no ablacionados, aclimatados a diferentes temperaturas Transcriptomic assessment of the exposure to CTMax in ablated and non ablated Litopenaeus vannamei, acclimated at different temperatures | |
| Laura Liliana López Galindo | |
| Galindo Sánchez Clara Elizabeth | |
| Acceso Abierto | |
| Atribución | |
| Litopenaeus vannamei | |
| Litopenaeus vannamei es una especie económicamente importante y su cultivo se ha extendido a nivel mundial. Para acelerar las tasas de reproducción se han implementado técnicas como la ablación de pedúnculo ocular para inducir la maduración gonadal en criaderos comerciales de camarones peneidos. El pedúnculo ocular contiene un complejo sistema neuroendocrino, el cual involucra elementos reguladores que le permiten responder a factores externos como la temperatura, salinidad, estrés, entre otros, mediante el ajuste de sus funciones vitales. En este estudio se evaluó el efecto de la ablación en branquia de Litopenaeus vannamei ablacionados y no ablacionados aclimatados a 20, 26 y 32°C, los cuales fueron sometidos a estrés térmico agudo a través de un análisis trancriptómico de genes involucrados en procesos como la regulación iónica y permeabilidad membranal, hipoxia y estrés térmico. Se obtuvieron valores de temperatura crítica máxima en un rango de 33.3-41.4°C. Mediante la validación de genes de referencia realizada se utilizaron los genes L8 y Ef1α para la normalización de los genes blanco (Hsp70, Hsp90, Hif1α y Na+/K+ATPasa). De acuerdo con los valores obtenidos de expresión relativa normalizada se encontró que la ablación induce la expresión del gen Hsp70 en organismos sometidos a estrés térmico agudo, independientemente de la temperatura de aclimatación. El gen HSP90 mantuvo niveles bajos y estables de expresión bajo las temperaturas de aclimatación de 20 y 26°C en organismos sometidos a estrés térmico agudo. Sin embargo, en organismos experimentales aclimatados a 32°C se obtuvo una expresión significativa de este gen y al adicionar el efecto de la ablación, la expresión se vio sobre expresada a niveles más altos. El gen Hif1α mostró una mayor expresión en organismos control que en organismos experimentales. Y para el caso del gen Na+/K+ ATPasa se observó una sobre expresión del gen, aunque no se presentaron diferencias significativas en la expresión del mismo. De acuerdo con los niveles de expresión de los genes Hif1α y Na+/K+ ATPasa se encontró que posiblemente existe un efecto de corregulación entre estos genes debido a la función que desempeñan. En general la regulación de la expresión de los genes evaluados en este trabajo, se vio afectada en los organismos ablacionados, lo cual indica que la eliminación de parte del sistema neuroendocrino de L. vannamei debido a la ablación, causa un desbalance energético y una des-regulación de los genes en los organismos expuestos a estrés térmico, los cuales se encuentran participando en procesos de osmoregulación, hipoxia y estrés térmico Litopenaeus vannamei is an economically important species and its farming has spread worldwide. Nevertheless, some techniques as the eyestalk ablation have been implemented to induce gonadal maturation in commercial hatcheries of penaeid shrimp, hence accelerating their reproduction rates. The shrimp eyestalk contains a complex neuroendocrine system, which involves regulatory elements that allow to respond to external factors such as temperature, salinity, stress, by adjusting its vital functions. On this study, the ablation effect was determined from gills samples of both ablated and non ablated L. vannamei, acclimated at 20, 26 and 32°C, and exposed to acute thermal stress to obtain the critical thermal maxima. This effect was assessed through a transcriptomic analysis of genes involved in processes such as ionic regulation and membrane permeability, thermal stress and hypoxia. The critical thermal maxima of the shrimp ranged from 33.3 to 41.4°C. Reference genes were validated in real time PCR, and the selected reference genes (L8 and Ef1α) were used to normalized the target genes (Hsp70, Hsp90, Hif1α and Na+/K+ ATPase). According to the relative normalized expression values, we found that ablation induce Hsp70 gene expression in organisms subjected to acute thermal stress, regardless of acclimation temperature. The Hsp90 gene showed low and stable levels of expression under acclimation temperatures of 20 and 26°C in organisms exposed to acute thermal stress. Nevertheless, in organisms acclimated to 32°C, the expression of Hsp90 increased significantly, and when ablation effect is coupled, this expression reached higher levels. The Hif1α gene showed higher expression in control than experimental organisms. The expression of Na+/K+ ATPase gene increased, although no significant differences on its expression were found. According to the observed expression levels of Hif1α and Na+/K+ ATPase we hypothesized a possibly effect of co-regulation between these genes due to their cellular level functions. In general, the ablated organisms showed alterations on expression regulation of the L. vannamei genes involved in processes of ionic regulation, hypoxia and thermal stress. | |
| CICESE | |
| 2014 | |
| Tesis de maestría | |
| Español | |
| López Galindo, L.L..2014.Evaluación transcriptómica de la respuesta a la exposición a TCMáx en Litopenaeus vannamei ablacionados y no ablacionados, aclimatados a diferentes temperaturas.Tesis de Maestría en Ciencias. Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada, Baja California. | |
| MICROBIOLOGÍA | |
| Aparece en las colecciones: | Tesis - Ciencias de la Vida |
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